侯孝仑，刘雅清，郭玮婷，高红亮，常忠义，步国建，鲁 伟，解秀娟，金明飞,*

（1.华东师范大学生命科学学院，上海 200241；2.泰兴市东圣食品科技有限公司，江苏 泰兴 225411）

原生质体融合提高产谷氨酰胺转氨酶菌株产量

侯孝仑1，刘雅清1，郭玮婷1，高红亮1，常忠义1，步国建2，鲁 伟2，解秀娟2，金明飞1,*

（1.华东师范大学生命科学学院，上海 200241；2.泰兴市东圣食品科技有限公司，江苏 泰兴 225411）

目的：研究并建立产谷氨酰胺转氨酶茂原链霉菌原生质体制备技术，通过原生质体融合技术筛选高产菌株。方法：以溶菌酶处理茂原链霉菌获得原生质体，采用原生质体融合技术，通过96 孔板高通量初筛、试管复筛、摇瓶验证选育高产菌株。结果：茂原链霉菌形成的原生质体再生出的菌落直径比较小，而菌丝生成的菌落直径比较大，两种形态的菌落96 孔板发酵后酶活力有显著性差异。不同的茂原链霉菌株制备原生质体，酶解程度、原生质体纯度、再生率有很大的差异，再生率最高可达1 804.25%，最低仅为12.76%。原生质融合后的高产菌株，选取96 孔板初筛酶活力前3%的菌株进行试管发酵，得到高产菌株比例为32.2%，酶活力比亲本高22.4%，经摇瓶验证产酶比对照提高16.28%。结论：利用基因组重排技术，可以初步对茂原链霉菌进行高产菌株选育。

茂原链霉菌；原生质体；再生；融合；基因组重排

谷氨酰胺转氨酶（transglutaminase，TGase）是一种巯醇酶，能够催化蛋白质与蛋白质、蛋白质与氨基酸之间发生酰胺基转移反应，从而使蛋白质发生交联。这种性质能够使其广……