杨亦扬，胡雲飞，万青，李荣林，王枫，阮建云



茶树硝态氮转运蛋白NRT1.1基因的克隆及表达分析

杨亦扬1,2，胡雲飞1，万青1，李荣林1，王枫3，阮建云2*

1. 江苏省农业科学院园艺研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室，江苏南京 210014；2. 中国农业科学院茶叶研究所农业部茶树生物学与资源利用重点实验室，浙江杭州 310008；3. 南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室，江苏南京 210095

以茶树（(L.)）品种龙井43为试材，采用PCR结合RACE技术，克隆得到硝态氮转运蛋白基因（）的cDNA全长序列，基因序列全长1 880 bp，其中开放阅读框（ORF）1 788 bp，编码595个氨基酸，预测蛋白质分子量为65.9 kD，理论等电点为8.99，命名为。序列分析表明，与葡萄氨基酸序列的相似性最高。通过生物信息学分析，对的氨基酸理化性质、亲/疏水性、跨膜区域及亚细胞定位进行了预测。实时定量PCR表达分析表明，茶树根和叶片中在1 mol·L-1NO3-处理5 min内均受到抑制，叶部表达量0.5 h后即达到最大值，24 h内各个时间点均高于根部，根中表达量始终低于对照。本研究结果为研究茶树对NO3-的吸收、转运和调控机理提供了分子生物学基础。

茶树；硝态氮；基因；实时定量PCR

茶树（(L.)）是原产中国的多年生木本植物，它以叶片为收获目标，对氮素需求量较大。氮肥施用量与茶叶品质成分氨基酸、茶多酚含量密切相关，所以，氮肥是茶园中主要的肥料，通常占施肥总量的一半以上[1]。茶树对不同氮源具有偏性吸收特性，对铵态氮的吸收量高于硝态氮的10倍以上，研究表明，造成这种差异的原因，主要在于吸收运载系统的差异[2-3]。……