抗增殖蛋白过表达对HepG2细胞增殖和凋亡的影响*
2016-10-17翟嵩孙明珠王文俊李亚萍张欣李梅党双锁
翟嵩,孙明珠,王文俊,李亚萍,张欣,李梅,党双锁
抗增殖蛋白过表达对HepG2细胞增殖和凋亡的影响*
翟嵩,孙明珠,王文俊,李亚萍,张欣,李梅,党双锁
目的探讨抗增殖蛋白(PHB)过表达对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法在已构建的PHB真核表达质粒pEGFP-N1-PHB瞬时转染HepG2细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测HepG2细胞增殖;使用流式细胞仪检测HepG2细胞周期和凋亡。结果转染pEGFP-N1-PHB细胞增殖明显低于pEGFP-N1空载转染细胞或未转染细胞(P<0.05);在转染后48 h,转染组G2/M期细胞比例为(27.84±0.47)%,显著高于空载转染组的(17.21±0.64)%或未转染组的(22.67±0.33)%(P<0.001);转染组细胞凋亡率为(31.72±0.35)%,显著高于空载转染组的(18.66±0.56)%或未转染组的(13.47±0.94)%(P<0.001)。结论PHB过表达可抑制人肝癌HepG2细胞增殖,诱导细胞进入G2/M期后被阻滞,并诱导细胞凋亡。
HepG2细胞;抗增殖蛋白;细胞凋亡;细胞增殖
抗增殖蛋白(Prohibitin)作为重要的细胞膜蛋白超家族成员之一,主要存在于线粒体内膜上,发挥着分子伴侣的作用[1]。近年来,越来越多的研究揭示抗增殖蛋白在新陈代谢、细胞增殖、免疫调节及其相关疾病中起作用[2~6]。在丙型肝炎病毒体外细胞培养系统(Hepatitis C virus in vitro cell culture system,HCV cc)抗增殖蛋白表达的研究发现Huh-7-HCV和Huh-7.5-HCV细胞抗增殖蛋白表达上调,提示其在HCV致病机制中起某些作用[7-12]。prohibitin高表达在肝脏疾病尤其是丙型肝炎的发病机制方面所发挥的作用尚不清楚。为了进一步阐明prohibitin的功能,诠释prohibitin表达上调在肝细胞损伤中所发挥的作用,本研究应用已构建的pEGFP-prohibitin真核表达系统,转染HepG2细胞,以探讨抗增殖蛋白表达上调对细胞增殖和凋亡的影响,并探讨抗增殖蛋白的作用机制,以期揭示抗增殖蛋白在HCV感染中的作用,进而为阐释HCV的致病机制提供理论依据。……
