张旭姣，迟乃玉，2，杨丽娜，王晓辉，张庆芳*

（1.大连大学生命科学与技术学院辽宁省海洋微生物工程技术研究中心，辽宁大连116622；2.沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳110866）

（+）γ-内酰胺酶菌株BH24发酵产酶条件优化

张旭姣1，迟乃玉1，2，杨丽娜1，王晓辉1，张庆芳1*

（1.大连大学生命科学与技术学院辽宁省海洋微生物工程技术研究中心，辽宁大连116622；2.沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳110866）

基于单因素试验，通过Plackett-Burman试验设计、最陡爬坡试验设计、中心组合试验设计和响应面分析，对（+）γ-内酰胺酶菌株BH24发酵产酶进行优化。单因素试验结果表明，在碳源为5.0 g/L葡萄糖、氮源为10.0 g/L蛋白胨、温度26.0℃、pH 8.0、接种量4.0%、装液量100 mL/500 mL、转速150 r/min条件下，菌株BH24的生物量、（+）γ-内酰胺酶酶活力及产物e.e.值均有不同程度的提高。响应面优化结果表明，当葡萄糖质量浓度为4.0 g/L，温度为25.2℃，pH值为7.6时，（+）γ-内酰胺酶酶活可达114.5 U/L，比优化前提高了50.7%。

（+）γ-内酰胺酶；发酵条件优化；响应面法

γ-内酰胺酶是催化酰胺类化合物γ-内酰胺酰胺键的一种新型酰胺酶［1］。光学纯的（-）γ-内酰胺是制备抗病毒药物的手性中间体［2］，是抗艾滋病药物（-）阿巴卡韦和（-）卡巴韦的合成原料，也是抗流感药物帕拉米韦的合成原料［3-4］。（+）γ-内酰胺酶能够高效率动力学拆分外消旋体γ-内酰胺，获得光学纯的（-）γ-内酰胺［5］。运用生物酶法进行工业化生产（-）γ-内酰胺，具有反应条件温和，产物光学纯度高，环境友好等优点［4］。此外，在酶催化的基础研究方面，因此类酶的个体一般具有多重的酶催化活性［6-7］，这种多重活力对于研究相关酶的催化机理之间的联系［8］以及这些酶之间的进化关系具有非常重要的科学意义。……