冯才伟，何方洋*，黄健，贾芳芳，李行

（1.北京勤邦生物技术有限公司，北京102206；2.北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心，北京102206；3.北京市优质农产品产销服务站，北京100101）

三唑磷单克隆抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究

冯才伟1，2，何方洋1，2*，黄健3，贾芳芳1，2，李行1，2

（1.北京勤邦生物技术有限公司，北京102206；2.北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心，北京102206；3.北京市优质农产品产销服务站，北京100101）

通过三唑磷与乙酰氯反应，得到三唑磷半抗原，通过免疫动物得到抗三唑磷单克隆抗体，将其应用于能够检测蔬菜中三唑磷残留量的酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒，结果表明：该试剂盒对结球甘蓝中三唑磷的检测限为49.6 μg/kg，IC50为6.9 μg/L，加样回收率为70.0%～93.5%，三唑磷标准曲线线性范围为1～81 μg/L，批内、批间的相对标准偏差（RSD）＜10%，三唑磷单克隆抗体与毒死蜱、对硫磷的交叉反应率分别为2.3%，3.8%。4℃条件该试剂盒下能够保存12个月，稳定性较好。

三唑磷；单克隆抗体；ELISA试剂盒

三唑磷是一种中等毒性的广谱有机磷杀虫剂［1］，作为高效替代农药已经大量使用多年。但是由于其半衰期较长、容易残留，环境和食品中其残留超标的问题逐渐引起关注。因此，建立三唑磷残留的快速检测技术，对加强其残留监测，减少环境污染，保障人体健康具有重要意义［2］。欧盟规定三唑磷作为农药品种在蜂王浆、花粉等不得检出（低于0.01 mg/kg），在水果、香菜、小豆蔻、黑胡椒、白胡椒等农产品中限量仅为0.07 mg/kg［3］；我国国家标准GB 2763—2014《食品中农药最大残留限量》中规定了三唑磷的最大残留限量为：蔬菜中结球甘蓝、节瓜均为100 μg/kg［4］。……