童海燕李国毅，2汤颖

（1.哈尔滨医科大学第一附属医院，哈尔滨 150001；2.同济大学附属东方医院，上海 200085）

Us11的表达及其多克隆抗体的制备

童海燕1李国毅1，2汤颖1

（1.哈尔滨医科大学第一附属医院，哈尔滨 150001；2.同济大学附属东方医院，上海 200085）

已有研究发现单纯疱疹病毒1（HSV-1）感染后，病毒的Us11 蛋白在拮抗宿主先天性免疫反应中发挥重要作用。通过合成HSV-1的Us11基因，克隆表达制备针对Us11的多克隆抗体，为研究Us11的功能以及与宿主蛋白的相互作用提供的实验基础。通过人工合成Us11基因并以其为模板扩增，回收Us11基因片段，克隆至原核和真核表达载体；诱导表达Us11蛋白并纯化，制备Us11兔源多克隆抗体；转染质粒至293T细胞，对细胞表达的蛋白进行间接免疫荧光（IFA）和免疫印迹（WB）检测。成功构建pCold-Us11和pFLAG-Us11质粒，实现可溶性Us11蛋白表达，纯化的Us11蛋白免疫动物获得针对Us11的多克隆抗体。IFA和Western blot结果显示，制备的抗血清能特异性检测到pFLAG-Us11转染293T细胞表达的Us11蛋白。

Us11；原核表达；真核表达；多克隆抗体

单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type 1，HSV-1）是一种全世界流行的疱疹性疾病病原体［1］。HSV-1基因组152 kb的双链DNA，编码76个以上的病毒蛋白。HSV-1主要感染人的口腔、皮肤黏膜、眼粘膜及中枢神经系统，引起龈口炎、唇疱疹、咽炎、角膜炎和疱疹性脑炎，而HSV-1引发的脑炎对人类健康危害最为严重［2］。近年来我国HSV-1感染发病率迅速上升，由其所引起的单纯疱疹病毒性脑炎（herpes simplex encephalitis，HSE）约占脑炎病例的5%-20%，占病毒性脑炎病例的20%-68%［3］。然而，HSV-1引发脑炎的病理机制尚不十分清楚。已有研究表明HSV-1 感染后，病毒Us11 蛋白在拮抗宿主先天免疫反应中发挥重要作用。……