祝亚娇，宋嘉宾，陈杨阳，孙炳刚，陈敬帮，魏雪团,2*

1(华中农业大学 农业微生物学国家重点实验室, 湖北 武汉，430070) 2(华中农业大学 食品科学技术学院，湖北 武汉，430070)



地衣芽胞杆菌工程菌高产纳豆激酶的发酵罐工艺优化及中试放大

祝亚娇1，宋嘉宾1，陈杨阳1，孙炳刚1，陈敬帮1，魏雪团1,2*

1(华中农业大学 农业微生物学国家重点实验室, 湖北 武汉，430070) 2(华中农业大学 食品科学技术学院，湖北 武汉，430070)

以前期构建的产纳豆激酶的地衣芽胞杆菌工程菌BL10 (pP43SNT-SsacC)为研究对象，进行5 L发酵罐工艺优化及中试放大研究。考察了5 L罐转速、温度和pH对纳豆激酶发酵过程的影响，优化了发酵条件：转速500 r/min、发酵温度37 ℃、自然pH，纳豆激酶发酵活性达62.90 FU/mL，比初始发酵活性提高了94%。在此基础上，进行了葡萄糖和混合氮源补料发酵研究，确定了5 L罐的补料发酵工艺，当葡萄糖的补加速率为1.5 g/(L·h)时，生物量提高31%，纳豆激酶发酵活性达到71.23 FU/mL，比对照提高了13%。在50 L罐和300 L罐的中试放大实验中，纳豆激酶发酵酶活分别达到67.23 FU/mL和72.33 FU/mL，纳豆激酶发酵活性相对稳定，为纳豆激酶的工业化生产奠定了基础。

纳豆激酶; 地衣芽胞杆菌工程菌; 液体发酵; 工艺优化; 中试放大

血栓性疾病严重影响人类的健康，中国每年约260万患者因血栓性疾病而死亡，约占全世界死亡患者的1/5。目前临床上常用的溶栓药物有尿激酶、链激酶和纤溶酶原激活剂(t-PA)，但这些药物存在副作用大、价格昂贵、半衰期短等缺点[1]。纳豆激酶是分离自日本纳豆的一种微生物纤溶酶，具有高效的溶栓活性，在预防和治疗血栓性疾病方面效果显著[2-3]。……