白培贤，王丽鸳，韦康，阮丽，成浩，张芬，张成才

1.中国农业科学院茶叶研究所/国家茶树改良中心/农业部茶树生物学与资源利用重点实验室，浙江 杭州 310008；2.中国农业科学院研究生院，北京 100081

茶树丙氨酸氨基转移酶基因的克隆与表达分析

白培贤1，2，王丽鸳1*，韦康1，阮丽1，成浩1，张芬1，2，张成才1，2

1.中国农业科学院茶叶研究所/国家茶树改良中心/农业部茶树生物学与资源利用重点实验室，浙江 杭州 310008；2.中国农业科学院研究生院，北京 100081

丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotransferase，AlaAT）是与碳氮代谢相关的一种重要酶类。采用反转录PCR的方法克隆了茶树CsAlaAT1的cDNA序列，该序列全长1 747 bp，包含一个完整的ORF（1 626 bp），编码 541个氨基酸，推导的蛋白质分子量为 59.4 kD，理论等电点（pI）为 5.82。同源比对结果表明，CsAlaAT1含有丙氨酸氨基转移酶亚家族保守的辅酶磷酸吡哆醛结合位点，其氨基酸序列与拟南芥 AtAlaAT1蛋白的相似性为84%。二级结构预测显示该蛋白由α-螺旋（40.67%）、无规则卷曲（29.57%）、β-折叠（13.68%）和延伸链（16.08%）组成，定位于线粒体，不含信号肽与跨膜结构。实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测发现CsAlaAT1在茶树各组织中均有表达，在根中的表达量最高；CsAlaAT1基因表达对氮素的响应研究表明，成熟叶中CsAlaAT1受氮素诱导上调表达，高浓度（1 mmol·L-1NH4NO3）氮素的诱导效应比低浓度（0.1 mmol·L-1NH4NO3）氮素诱导效应更强烈；在根中，处理24 h后，高氮诱导CsAlaAT1上调表达，低氮诱导CsAlaAT1下调表达。

茶树；丙氨酸氨基转移酶；克隆；表达；氮素诱导

氮素是植物生长发育过程中需求量最大的矿质元素，氮素供应不足会严重影响农作物的产量。为了保证产量，在现代农业生产过程中往往施用大量氮肥。……