SDNF联合HGF对大鼠肌卫星细胞体外活性的作用
2016-09-21徐永清朱崇涛陈旭升
邬 江,徐永清,朱 敏,朱崇涛,陈旭升
SDNF联合HGF对大鼠肌卫星细胞体外活性的作用
邬江,徐永清,朱敏,朱崇涛,陈旭升
目的探讨许旺细胞源神经营养因子(SDNF)联合肝细胞生长因子(HGF)对鼠肌卫星细胞增殖分化的作用。方法建立大鼠肌卫星细胞体外培养体系,按培养基不同分为4组:10%胎牛血清培养基(A组)、10%胎牛血清+400 ng/ml SDNF(B组)、10%胎牛血清+200 ng/mlhGF(C组)和10%胎牛血清+400 ng/ml SDNF+200 ng/mlhGF(D组),动态观测肌卫星细胞的形态、MTT生长曲线和肌管形成率等指标的变化。结果含不同因子的培养基均可促进肌卫星细胞增殖;MTT检测结果显示,C组和D组细胞生长较为旺盛,但B、C、D组间差异尚无统计学意义(P>0.05),而A组的细胞增殖较其他3组缓慢(P<0.05);与A组相比,其他3组细胞融合数明显增多,以B组和D组肌管形成较为突出(P<0.01)。结论HGF主要作用于肌卫星细胞的激活和增殖,而SDNF则侧重于肌卫星细胞的分化,两种因子共同作用有某种程度的叠加效果。
肌卫星细胞;许旺细胞源神经营养因子;肝细胞生长因子;增殖;分化
肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是目前已知的唯一可激活静息状态肌卫星细胞的细胞因子。许旺细胞源神经营养因子(Schwann cell-derived neurotrophic factor,SDNF)是近年来从许旺细胞中提取的,具有运动神经元保护和促周围神经再生的一种神经营养因子[1-2]。而肌卫星细胞作为周围神经主要靶器官——肌肉的干细胞,经证实在体外其增殖和分化与SDNF有一定的相关性。然而HGF和SDNF对肌卫星细胞生物活性的联合作用尚无相关的研究报道。为肌组织工程进一步研究的需要,为获得高产量和高成肌性的肌卫星细胞,有必要在体外评估这两种因子对肌卫星细胞活性的联合作用,为此本课题进行了相关研究。
1 材料与方法
1.1SDNF制备按本实验室标准操作程序[3]制备SDNF。
1.2细胞培养及分组细胞取自3月龄Wistar雄性大鼠[由南方医科大学动物所提供,动物合格证号:SCXK(粤)2006-0015]。具……
