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江南卷柏Phi类谷胱甘肽S-转移酶的分子特性

2016-09-19张元杰杨志灵杨海灵

生物工程学报 2016年7期
关键词:植物

张元杰,杨志灵,杨海灵



江南卷柏Phi类谷胱甘肽-转移酶的分子特性

张元杰,杨志灵,杨海灵

北京林业大学 生物科学与技术学院,北京 100083

谷胱甘肽-转移酶 (Glutathione-transferase, GST) 在帮助植物抵抗各种胁迫中发挥重要作用。该研究从江南卷柏中克隆到两个Phi类GST基因,分别命名为和,两个基因均编码215个氨基酸残基的蛋白质。表达模式分析发现,这两个基因在江南卷柏根、茎和叶中均有表达。将这两个基因在大肠杆菌中诱导表达重组蛋白并纯化,酶学性质分析表明SmGSTF1和SmGSTF2对CDNB、NBD-Cl和NBC等3种底物都有活性。SmGSTF1对Fluorodifen和Cum-OOH也有活性,而SmGSTF2对它们没有活性。酶动力学分析表明SmGSTF1和SmGSTF2对GSH有较高的亲和力,而对CDNB的亲和力都相对较低。在不同pH及温度条件下对SmGSTF1和SmGSTF2重组蛋白进行活性测定,发现这两个蛋白在pH 7−8.5,45−55 ℃温度范围内有较高的催化活性。研究推测,SmGSTF1和SmGSTF2可能在江南卷柏的抗逆生理过程中有重要的作用。

江南卷柏,谷胱甘肽-转移酶,基因表达,酶学性质

蕨类植物起源于距今4亿年前,相比较苔藓植物,蕨类植物孢子体内部有明显的维管组织的分化,因而在原始维管植物的进化中具有重要意义[1]。江南卷柏是蕨类植物的现存种之一,在中国广泛分布于长江流域和长江以南各地[2],是一种常用的具有清热活血作用的药用植物[3]。对其进行研究有助于理解蕨类植物适应更复杂陆地环境的作用机制。

谷胱甘肽-转移酶 (Glutathione-transferase,GST,EC 2.5.1.18) 是一类具有多种生理功能的蛋白质超家族,广泛存在于哺乳动物、植物、鸟类、昆虫、寄生虫及微生物体内。……

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