王　强，李　旭，张旭姣，张庆芳，窦少华，金连豆，迟乃玉*

（1.大连大学生命科学与技术学院，辽宁大连116622；2.辽宁省海洋微生物工程技术研究中心，辽宁大连116622；3.大连市生产力促进中心，辽宁大连116025）

葡甘聚糖酶高产菌株Q1发酵条件优化及酶的分离纯化

王强1，2，李旭3，张旭姣1，2，张庆芳1，2，窦少华1，2，金连豆1，2，迟乃玉1，2*

（1.大连大学生命科学与技术学院，辽宁大连116622；2.辽宁省海洋微生物工程技术研究中心，辽宁大连116622；3.大连市生产力促进中心，辽宁大连116025）

该研究以海洋来源的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Q1为出发菌株，通过单因素实验对葡甘聚糖酶产生菌Q1发酵条件进行优化，并将菌株Q1发酵所得上清液经硫酸铵沉淀、透析、超滤离心和Sephadex G-100凝胶过滤层析，得到电泳纯的葡甘聚糖酶，并研究其部分酶学性质。结果表明，最佳发酵条件为魔芋粉添加量0.75%、牛肉膏添加量为0.2%，蛋白胨添加量为0.4%、氯化钠添加量0.4%、培养温度26℃、转速160 r/min、接种量5%、初始pH 7.0、装液量100 m L/250 m L。在此条件下，葡甘聚糖酶酶活为241.61 U/m L。葡甘聚糖酶相对分子质量为41.3 ku；酶最适作用底物为葡甘聚糖。

葡甘聚糖酶；发酵条件；优化；分离纯化

葡甘聚糖酶（glucomannanase）是一种能将葡甘聚糖降解为葡甘低聚糖的外泌酶。葡甘聚糖是魔芋的主要成分，由甘露糖和葡萄糖单元按1.6∶1.0的摩尔比通过β-1，4-糖苷键相连的天然多糖高分子［1-2］。葡甘低聚糖是由葡萄糖和甘露糖组成的杂聚寡糖，最初从酵母的细胞壁中提取获得［3］。生物酶法降解葡甘聚糖可通过两种途径：一种是采用微生物代谢产生的葡甘聚糖酶酶解；……