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(+)γ-内酰胺酶菌株的筛选鉴定及其部分酶学特性研究

2016-09-19张旭姣迟乃玉王晓辉金连豆张庆芳

中国酿造 2016年5期

张旭姣,迟乃玉,2,王 强,王晓辉,金连豆,张庆芳*

(1.大连大学生命科学与技术学院,辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连116622;2.沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866)

(+)γ-内酰胺酶菌株的筛选鉴定及其部分酶学特性研究

张旭姣1,迟乃玉1,2,王强1,王晓辉1,金连豆1,张庆芳1*

(1.大连大学生命科学与技术学院,辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连116622;2.沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866)

以N-乙酰-L苯丙氨酸为唯一碳源进行初筛,手性HPLC测酶活力进行复筛,从海泥、海水、土壤等环境中筛选到一株(+)γ-内酰胺降解菌BH24。经形态学、生理生化、16S rDNA序列分析鉴定及系统发育分析,菌株BH24鉴定为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),为获取(+)γ-内酰胺酶提供了一种新的菌源。来源于菌株BH24的(+)γ-内酰胺酶,最适温度为28℃,最适pH值为7.0。

(+)γ-内酰胺酶;苏云金芽孢杆菌;鉴定;酶学特性

γ-内酰胺酶(EC 3.5.2.-)是催化酰胺类化合物γ-内酰胺酰胺键的一种新型酰胺酶(EC 3.5.1.4)[1]。光学纯的(-)γ-内酰胺是制备抗病毒药物的手性中间体[2],是抗艾滋病药物(-)阿巴卡韦和(-)卡巴韦的合成原料,也是抗流感药物帕拉米韦的合成原料。(+)γ-内酰胺酶能够高效率动力学拆分外消旋体γ-内酰胺,获得光学纯的(-)γ-内酰胺[3]。此外,γ-内酰胺酶催化外消旋体γ-内酰胺还可获得不同构型的γ-氨基丁酸类似物(γ-aminobutyric acid,GABA)[4]。GABA是一种抑制性神经递质,它参与多种代谢活动,具有很高的生理活性[5-6]。因此有必要分离该对映体混合物,在此基础上合成其他碳环核苷类药物。运用生物酶法进行工业化生产(-)γ-内酰胺,具有反应条件温和,产物光学纯度高,环境友好等优点[6]。……

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