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高效液相色谱法测定酵母细胞壁中甘露聚糖和β-葡聚糖

2016-09-18徐婷婷张子健周雪玲陈志颖

中国酿造 2016年7期
关键词:检测

徐婷婷,刘 艳,张子健,周雪玲,陈志颖

高效液相色谱法测定酵母细胞壁中甘露聚糖和β-葡聚糖

徐婷婷,刘艳,张子健,周雪玲,陈志颖*

(唐山拓普生物科技有限公司,河北 唐山 063000)

建立了利用高效液相色谱同时检测酵母细胞壁中的甘露聚和β-葡聚糖含量的方法。色谱条件为采用Welch Sugar-Ca(7.8 mm× 300 mm)色谱柱,以纯水为流动相,流速为0.5 mL/min,柱温为80℃,示差折光检测器进行检测。结果表明,甘露聚糖和β-葡聚糖在200~1 000 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,方法的相对标准偏差<1.15%,回收率为98%~100%。该方法简单,准确方便,适用于酵母细胞壁中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的检测。

β-葡聚糖;甘露聚糖;高效液相色谱;酵母细胞壁

酵母甘露聚糖(yeast mannan)和β-葡聚糖(β-glucan)是酵母细胞壁的重要组成成分,二者的总量大约占细胞壁总干质量的85%[1],其中甘露聚糖位于细胞壁的外层,约占细胞壁干质量的40%~45%[2],而β-葡聚糖则位于细胞壁的内侧,占细胞壁干质量的26%~30%[3]。

酵母β-葡聚糖是一种以β-1,3-D糖苷键为主链,β-1,6-D糖苷键为侧链的活性多糖[4]。它能够刺激释放白介素以增强机体防御有害物质的能力,提高人体免疫力[5-7]。同时具有抗辐射[8]、抗癌[9]、调节血脂、降低胆固醇[10]和促进伤口愈合[6]等功能。酵母甘露聚糖又称甘露糖蛋白,由两种糖肽键组成,主链为单链,糖苷键以α-1,6形式连接,主链上有丰富的支链[10]。甘露聚糖具有免疫调节[12]、改善肠道健康[13]、选择性吸附病原微生物[14]等功能。

酵母β-葡聚糖和甘露聚糖的检测一般采用不同的方法分开进行检测,酵母β-葡聚糖检测多采用苯酚-硫酸法[14-16]和高效液相色谱法[17-19]进行,甘露聚糖的检测多采用总糖检测方法和紫外分光光度法[20-22]。……

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