陈　磊，赵祥颖，刘建军，

坎皮纳斯类芽孢杆菌木聚糖酶的纯化以及酶学性质

陈磊1，赵祥颖2，刘建军1，2*

（1.齐鲁工业大学 生物工程学院，山东 济南 250013；2.山东省食品发酵工程重点实验室，山东 济南 250013）

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-50凝胶过滤、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析对坎皮纳斯类芽孢杆菌（Paenibacillus campinasensis）xy-7发酵液进行分离纯化，获得纯化的木聚糖酶，纯化倍数为26.36，酶活回收率为5.13%。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）结果为单一条带，分子质量为24.5 ku。酶学性质研究结果表明，该酶的最适反应温度为60℃，最适pH值为8.0。K+、Fe2+对酶有激活作用，Zn2+、Cu2+对酶有强烈的抑制作用。以榉木木聚糖为底物时，米氏常数Km=4.733 mg/mL，最大酶反应速率Vm=315.85 μmol/（min·mg）。

坎皮纳斯类芽孢杆菌；木聚糖酶；分离纯化；酶学性质

木聚糖（xylan）是由β-1，4木糖苷键连接起来的多聚糖，分子中含有许多葡萄糖醛酸、乙酰基、阿拉伯糖、阿魏酸、香豆酸等侧链基团［1］。它是半纤维素中最主要的成分，在农业上被当作废料而大量浪费［2］。木聚糖酶是降解半纤维素木聚糖的一组酶的总称［3］，包括切β-1，4-内切木聚糖酶、β-D-木糖苷酶、α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶、α-D-葡萄糖醛酸苷酶、乙酰木聚糖酯酶和酚酸酯酶等［4］。在木聚糖降解酶系中，β-1，4-内切木聚糖酶是使木聚糖完全水解最关键的酶，主要来源于细菌、真菌、放线菌等微生物［5］。目前，木聚糖酶在食品行业中引人注目的应用是作为面包品质改良剂［6］。在造纸行业中，碱性木聚糖酶可以提高纸浆的漂白率，并因此减少化学漂白剂的用量［7］。大多数木聚糖酶的分离纯化采用多步非特异性方法，如粗沉淀之后，采用离子交换、凝胶层析、疏水层析等［8］。……