金连豆，李晓艳*，王晓辉，迟乃玉，张庆芳，张旭姣，王　强

（1.大连大学 生命科学与技术学院，辽宁 大连 116622；2.辽宁省海洋微生物工程技术研究中心，辽宁 大连 116622）

海洋胶红酵母菌CD-008产超氧化物歧化酶发酵条件优化及酶分离纯化

金连豆1，2，李晓艳1，2*，王晓辉1，2，迟乃玉1，2，张庆芳1，2，张旭姣1，2，王强1，2

（1.大连大学 生命科学与技术学院，辽宁 大连 116622；2.辽宁省海洋微生物工程技术研究中心，辽宁 大连 116622）

在单因素试验基础上，结合Plackett-Burman、Box-Behnken设计及响应面分析法进行回归分析以确定海洋胶红酵母菌Rhodotorulasp.CD-008产超氧化物歧化酶最佳发酵条件，并通过盐析、超滤离心、Sephadex G-100凝胶过滤层析研究了酶的分离纯化条件。结果表明，pH、转速、温度对酶活力有显著影响，最优发酵条件为pH 5.34、转速150 r/min、温度21.40℃，优化后发酵液酶活力达到6 430.52 U/g湿菌体，比优化前提高了1.53倍。粗酶液经65%饱和度的硫酸铵盐析、超滤离心、Sephadex G-100凝胶过滤层析后获得的SOD比酶活达到419.90 U/mg，纯化倍数为9.60倍，蛋白回收率为8.2%。SDS-PAGE凝胶电泳显示，纯化后的SOD的分子质量约为37.5 ku。

海洋胶红酵母菌CD-008；超氧化物歧化酶；发酵条件；分离纯化

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）是一类广泛存在于生物体内的酸性金属酶，能够专一地去除破坏体内新陈代谢的超氧阴离子，被称为“人体垃圾的清道夫”［1］。超氧化物歧化酶不仅在体内氧化与抗氧化平衡过程中起到重要作用，在肿瘤的检测研究中也得到应用，如SOD mRNA的表达含量可以作为判定乳腺浸润性导管癌治愈的指标［2］；在疾病的治疗、辐射的防护过程中，SOD还可以清除体内多余的超……