李慧芝，康振，李江华，周景文，堵国成

1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 2141222 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122

生物育种与工艺优化

常压室温等离子体诱变扭脱甲基杆菌AM1高产吡咯喹啉醌

李慧芝1，2，康振1，2，李江华1，2，周景文1，2，堵国成1，2

1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122
2 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122

李慧芝， 康振， 李江华， 等. 常压室温等离子体诱变扭脱甲基杆菌 AM1高产吡咯喹啉醌. 生物工程学报， 2016， 32（8）: 1145-1149.

Li HZ， Kang Z， Li JH， et al. Heterologous expression and characterization of Klebsiella oxytoca lysine decarboxylase. Chin J Biotech， 2016， 32（8）: 1145-1149.

吡咯喹啉醌 （Pyrroloquinoline quinone，PQQ） 作为一种新型的氧化还原酶辅酶，在医药和食品等领域有广阔的应用前景。为改善扭脱甲基杆菌Methylobacterium extorquens AM1 PQQ生产性能，采用常压室温等离子体 （Atmospheric and room temperature plasma， ARTP） 进行诱变，结合高通量快速筛选方法，得到以PQQ产量为指标的正向突变株。ARTP诱变的菌株正突变率为31.6%，筛选得到的较优正突变株M. extorquens AM1 （E-F3），PQQ产量达到54.0 mg/L，是出发菌株的近3倍。系统的高通量方法筛选ARTP诱变菌为后续进一步提高M. extorquens AM1菌株PQQ的产量奠定了基础，亦为改善菌株生产性能提供了新思路。

常压室温等离子体，吡咯喹啉醌，高通量筛选，正向突变

吡咯喹啉醌 （Pyrroloquinoline quinone，PQQ）是继烟酰胺核苷酸和黄素核苷酸之后发现的第 3类氧化还原酶的辅酶［1-2］，能通过参与蛋白转运来调节酶的活性［3］。PQQ是高水溶性、热稳定性分子，具有强大的抗氧化活性［4］，是当今科学界的研究热点。

诱变育种是菌种改良的重要手段［5］，针对传统诱变方法的低突变率和操作安全性不足等问题［6］，研究人员发展了新型常压室温等离子体（Atmospheric and room temperature plasma， ARTP）诱变技术［7］。……