王伍，纪松军，黄招竹，卢彬彬，吕建新温州医科大学 检验医学院 生命科学学院 浙江省模式生物技术与应用重点实验室，浙江 温州 325000

环境生物技术

构建一种检测水中As3+的敏感型大肠杆菌

王伍*，纪松军*，黄招竹，卢彬彬，吕建新
温州医科大学 检验医学院 生命科学学院 浙江省模式生物技术与应用重点实验室，浙江 温州 325000

王伍， 纪松军， 黄招竹， 等. 构建一种检测水中As3+的敏感型大肠杆菌. 生物工程学报， 2016， 32（8）: 1081-1092.

Wang W， Ji SJ， Huang ZZ， et al. Construction of an Escherichia coli strain for sensitive detection of arsenite ion in water. Chin J Biotech， 2016， 32（8）: 1081-1092.

为构建一种敏感性强、特异性好的检测砷离子的大肠杆菌荧光报告菌株，本研究利用基因敲除技术，敲除了大肠杆菌中负责向胞外转运砷离子的arsB基因，构建对As3+敏感的菌株；利用egfp基因作为报告基因，构建融合检测载体pET28b-Pars-arsR-egfp。然后将检测载体pET28b-Pars-arsR-egfp转化至arsB基因敲除菌中完成敏感型 As3+检测菌株的构建。接着对此微生物传感器进行了检测条件的优化，以及线性检测范围、最低检出限、特异性等性能的确定。研究结果表明，与利用野生大肠杆菌作为检测宿主相比，此敏感型砷检测菌株对检测As3+的灵敏度有显著提高，最适检测As3+浓度范围为0.013-42.71 μmol/L，最低检出下限为5.13 nmol/L。因此，本研究利用基因敲除技术对大肠杆菌进行改造，成功地提高了砷检测微生物传感器的灵敏度，为重金属微生物传感器的优化研究工作提供了有用方案。

As3+检测，大肠杆菌，arsB基因，基因敲除，敏感性

砷 （As） 是环境中常见的污染物，能通过多种途径进入人体，对人体的多种组织和器官都能造成明显的损伤［1］。IARC （国际癌症研究机构）和WHO将砷列为人类致癌物。……