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氟、砷对原代培养大鼠海马神经细胞氧化应激及凋亡影响的实验观察

2016-09-05马小惠黄志超于亚鹭郑玉建王彦茹

新疆医科大学学报 2016年6期
关键词:海马氧化应激剂量

马小惠, 张 杰, 黄志超, 马 艳, 吴 军, 于亚鹭, 郑玉建, 王彦茹

(新疆医科大学公共卫生学院, 乌鲁木齐 830011)



氟、砷对原代培养大鼠海马神经细胞氧化应激及凋亡影响的实验观察

马小惠, 张杰, 黄志超, 马艳, 吴军, 于亚鹭, 郑玉建, 王彦茹

(新疆医科大学公共卫生学院, 乌鲁木齐830011)

目的本研究通过体外细胞实验,观察氟、砷单独及联合染毒对大鼠海马神经细胞氧化应激及细胞凋亡的影响。方法采用2因素3水平的析因设计,将体外培养的海马神经细胞分为9组,分别为对照(细胞培养液)组、低剂量砷(2 μmol/ L亚砷酸钠)染毒组、高剂量砷(10 μmol/ L亚砷酸钠)染毒组、低剂量氟(10 μmol/ L氟化钠)染毒组、高剂量氟(50 μmol/ L氟化钠)染毒组、低剂量砷(2 μmol/ L亚砷酸钠)+低剂量氟(10 μmol/ L氟化钠)联合染毒组、低剂量砷(2 μmol/ L亚砷酸钠)+高剂量氟(50 μmol/ L氟化钠)联合染毒组、高剂量砷(10 μmol/ L亚砷酸钠)+低剂量氟(10 μmol/ L氟化钠)联合染毒组及高剂量砷(10 μmol/ L亚砷酸钠)+高剂量氟(50 μmol/ L氟化钠)联合染毒组。采用MTT还原法检测细胞存活情况;采用微量酶标法测定细胞中谷胱苷肽(GSH)含量;采用硫代巴比妥法(TBA)测定谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;采用WST-I法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力;采用化学比色法测定丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)活力;采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率。结果与对照组比较,高剂量砷、高剂量氟、低剂量砷+高剂量氟、高剂量砷+低剂量氟以及高剂量砷+高剂量氟联合染毒组海马神经细胞MTT吸光度值明显降低(P<0.05);高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞CAT活力明显降低(P<0.05);高剂量砷染毒组、高剂量氟染毒组、低剂量砷+高剂量氟联合组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞GSH含量明显下降(P<0.05);高剂量氟染毒组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞GSH-Px活力明显下降(P<0.05);高剂量砷染毒组、高剂量氟染毒组、低剂量砷+高剂量氟联合组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞MDA含量明显升高(P<0.05);高剂量砷染毒组、高剂量氟染毒组、低剂量砷+高剂量氟联合组、高剂量砷+低剂量氟联合组及高剂量砷+高剂量氟联合组细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论氟、砷可导致大鼠海马神经细胞氧化应激并引起细胞凋亡率升高,这可能是氟、砷对动物学习记忆能力产生影响的重要原因。

亚砷酸钠; 氟化钠; 氧化应激; 凋亡

流行病学研究及动物实验均表明,氟、砷暴露可对中枢神经系统产生负面影响,并可导致学习记忆能力下降[1-2],但其对学习记忆能力损伤所涉及的细胞学及分子机制并未完全阐明。……

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