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芹菜素对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响

2016-09-02朴虎雄玄云泽

重庆医学 2016年13期
关键词:检测

李 英,朴虎雄,玄云泽

(延边大学附属医院口腔科,吉林延吉 133000)



·经验交流·

芹菜素对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响

李英,朴虎雄,玄云泽△

(延边大学附属医院口腔科,吉林延吉 133000)

目的探讨芹菜素对体外培养的人舌癌Tca8113细胞增殖及凋亡的作用。方法不同浓度(20、40、80、160 μmol/L)芹菜素处理舌癌Tca8113细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测对细胞增殖的抑制作用;Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞的凋亡率;逆转录PCR(RT-PCR)法检测B淋巴细胞癌-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA表达变化。结果芹菜素各组细胞增殖均有不同程度的抑制,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。芹菜素对Tca8113细胞增殖的抑制效果呈一定程度的时间依赖性和剂量依赖性,随着浓度提高和作用时间延长,抑制效果更明显(P<0.05)。对照组及不同浓度芹菜素组(除20 μmol/L)组间两两比较,药物浓度越高,细胞凋亡率越显著(P<0.05)。除20 μmol/L外芹菜素各浓度组组人舌鳞癌细胞连续培养48 h后,Bcl-2 mRNA的表达水平随着浓度降低,而Bax mRNA表达水平增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论芹菜素对人舌癌Tca8113细胞的增殖具有抑制作用,并诱导细胞的凋亡,其机制可能与抑制Bcl-2 mRNA表达、促进Bax mRNA表达有关。

芹菜素;癌,鳞状细胞;舌肿瘤;细胞凋亡;细胞增殖;基因,bcl-2;bax

芹菜素是一种天然黄酮类化合物,具有抗菌、抗病毒、抗氧化等药理作用,尤其抗肿瘤作用较明显[1-3]。国内外众多学者对芹菜素的抗肿瘤作用及其机制做了大量研究,然而有关舌鳞癌方面研究报道较少。本研究检测芹菜素对舌鳞癌细胞株Tca8113细胞增殖及凋亡的影响,对凋亡机制进行了初步探讨,为人舌癌的预防及治疗提供理论依据和实验基础。

1 材料与方法

1.1材料芹菜素购自美国Sigma公司;RPMI-1640培养基购自北京Hyclone公司;胰蛋白酶、胎牛血清、四甲基偶氮唑盐(MTT)、50×Tae电泳缓冲液购自北京Solarbio公司;二甲基亚砜(DMSO)购自美国AMRESCO公司;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂购自上海bestbio公司;焦碳酸二乙酯(DEPC)购自北京NobleRyder公司;琼脂糖购自西班牙biowest Agarose公司;Trizol总RNA抽提试剂盒购自北京ihvitrogen公司;一步法逆转录PCR(RT-PCR)Kit试剂盒、Maker购自日本TaKaRa公司;溴化乙锭(EB)购自北京sybr green公司;内参照β-actin引物、B淋巴细胞癌-2(Bcl-2)引物、Bcl-2相关X蛋白(Bax)引物,购自上海生工生物技术有限公司。……

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