孙杰，陈梁，娄波，白彦兵，汪钊

（1.亿帆鑫富药业股份有限公司博士后科研工作站，浙江临安311300；2.浙江工业大学生物工程学院，浙江杭州310014）

催化蔗糖-6-乙酸酯合成的微生物筛选和培养条件优化

孙杰1，2，陈梁1，娄波1，白彦兵1，汪钊2

（1.亿帆鑫富药业股份有限公司博士后科研工作站，浙江临安311300；2.浙江工业大学生物工程学院，浙江杭州310014）

三氯蔗糖是目前最优秀的功能性甜味剂之一，其合成的关键步骤是蔗糖-6-乙酸酯的合成。从土壤中分离到一株能够在有机溶剂中催化合成蔗糖-6-乙酸酯的杆状细菌，命名为WZS01。对该菌株的培养基和培养条件进行了初步优化，在2.5%葡萄糖，1%蛋白胨，0.1%酵母粉培养基中，以聚氨酯泡沫作为菌体固定化基质，30℃培养18 h。将吸附有菌体的聚氨酯泡沫干燥后作为催化剂，在2%底物浓度下，在二甲基甲酰胺/叔丁醇反应介质中催化18 h，蔗糖-6-乙酸酯的摩尔产率达到83.3%，并通过红外和核磁确认了产物结构。

三氯蔗糖；蔗糖-6-乙酸酯；固定化细胞；聚氨酯泡沫

三氯蔗糖是一种基于蔗糖合成的新型甜味剂，具有甜度高、味质好、储存期长、无热量和安全性高等优点。三氯蔗糖合成的关键步骤是蔗糖-6-乙酸酯的合成。目前蔗糖-6-乙酸酯的合成以化学法为主，化学法反应条件苛刻、区域选择性较差、容易生成副产物，导致合成产物纯度较低，影响了产品的质量［1-2］。酶催化反应因为具有区域选择性强、反应条件温和等诸多优点，成为了蔗糖酯选择性合成中的研究热点。能特异性酯化蔗糖6位羟基的脂肪酶菌种来源有假单胞菌［3］、米黑毛霉［4］和柔毛腐质霉［5］，主要用于合成长链酯。……