崔雨 王颖 甘星 宋娟 韩俊

450000郑州人民医院（崔雨）；261000潍坊医学院（王颖）；430000武汉医疗救治中心（甘星）；102206北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室（宋娟、韩俊）崔雨，王颖为并列第一作者

EV71 IgM抗体均相酶联免疫检测方法的初步建立

崔雨 王颖 甘星 宋娟 韩俊

450000郑州人民医院（崔雨）；261000潍坊医学院（王颖）；430000武汉医疗救治中心（甘星）；102206北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室（宋娟、韩俊）
崔雨，王颖为并列第一作者

目的 建立一种快速检测肠道病毒71型（EV71）IgM抗体的均相ELISA新技术。方法 首先克隆表达纯化EV71 VP1蛋白，使用生物素标记该蛋白。通过ELISA法摸索出Bio-EV71 VP1的最适抗原量为0.0375 μg。优化供体微球、受体微球、血清等实验反应体系，建立EV71 VP1的均相酶联免疫检测方法的IgM检测技术。使用EV71感染的手足口病（HFMD）患者和健康人血清进行均相酶联免疫检测方法检测评价，并与ELISA检测结果相比较。结果 获得EV71 VP1纯化蛋白并生物素化。摸索出均相酶联免疫检测方法的体系：5 μg/m1受体微球、0.037 5 μg生物素化的VP1、20 μg/m1供体微球、血清2 μ1，总体系为20 μ1。采用ELISA和均相酶联免疫检测方法检测方法对样本血清进行IgM检测。两种方法同时检出手足口病患者1gM阳性16份；14份ELISA法检出阴性样本中，均相酶联免疫检测方法法检出阳性6份。20份健康人血清，2种方法检测结果均为阴性。结论 本研究初步建立了EV71 VP1 IgM的均相酶联免疫检测方法。

【主题词】 EV71；VP1；IgM；均相酶联免疫检测方法基金项目：传染病重大专项……