蓝天云,范　红，陈勇彬，杨翠萍，赵兴旺，李　岩

(1.昆明理工大学医学院，云南 昆明　650032；2.云南省第一人民医院，云南 昆明　650032；3.中国科学院昆明动物研究所，云南 昆明　650223)



金丝桃素在细胞水平对抗乙肝病毒新靶点pgRNA的作用研究

蓝天云1，2,范红1,2，陈勇彬3，杨翠萍3，赵兴旺1，李岩1,2

(1.昆明理工大学医学院，云南 昆明650032；2.云南省第一人民医院，云南 昆明650032；3.中国科学院昆明动物研究所，云南 昆明650223)

乙型病毒性肝炎是由乙型嗜肝DNA病毒(hepatitis B virus, HBV)引起的一种世界范围内的传染性疾病，对人类健康危害重大[1]。目前，临床上应用最广泛的抗乙肝病毒药物是拉米夫定(lamivudine, 3TC)等核苷类化合物[2]，但长期应用核苷类药物，编码HBV DNA聚合酶/逆转录酶的基因区域会发生点突变而产生病毒耐药株，使得抗病毒效果大为下降[3]。因此，寻找新的抗病毒药物靶点成为乙肝研究中的重点与热点。金丝桃素(hypericin，4,4′,5,5′,7,7′-六羟基-2,2′-二甲基[中位]萘骈二蒽酮)，是贯叶连翘等金丝桃素植物的主要活性成分之一，有强效抗乙肝病毒活性，但与核苷类药物不同，其对HBV DNA聚合酶/逆转录酶无抑制作用，却可以明显下调pgRNA表达水平，提示其药物作用靶点可能与pgRNA相关[4]。本实验对金丝桃素抗乙肝病毒作用进行验证，并在此基础上对金丝桃素的可能靶点pgRNA以及靶点相关调控因子的表达进行了更加深入的研究。

1　材料与方法

1.1实验材料可分泌HBV活病毒的肝细胞株HepG2.2.15；金丝桃素(95%，HPLC，Sigma)；3TC(GSK)；高糖DMEM 培养液及胎牛血清(Gibco)；胰酶(碧云天)；地高辛标记及检测试剂盒(Roche)；Bio-Rad反转录试剂盒及SYBR Green荧光定量PCR检测试剂盒；……