陈泽文，陶 辉，周 晓，施 鹏，张家贵，宣海洋，占红英，石开虎

化学合成m icroRNA-29a inhibitors和m im ics 对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响

陈泽文，陶 辉，周 晓，施 鹏，张家贵，宣海洋，占红英，石开虎

目的 探讨微小RNA-29a（miR-29a）inhibitors和mimics对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法 取SD大鼠心肌组织，以组织块酶消化法分离细胞，通过差速贴壁离心法收集、培养SD大鼠心肌成纤维细胞。应用LipofectamineTM2000 Reagent分别向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染miR-29a inhibitors和miR-29amimics24 h和48 h后，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-29a、Ⅰ型胶原前胶原A1（Col1A1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的RNA水平的表达，MTT法检测细胞增殖活性。结果 与正常对照组和阴性对照组比较，在瞬时转染miR-29a inhibitors的心肌成纤维细胞中，miR-29a的表达水平下调；而在转染miR-29a m imics的心肌成纤维细胞中，miR-29a的表达水平上调。Col1A1在miR-29a inhibitors组中表达水平升高，而在miR-29am imics组中则表达水平降低。α-SMA在miR-29a inhibitors组中表达水平升高，在miR-29a mimics组中则表达水平降低。瞬时转染miR-29am imics 24、48 h后，与空白对照组和其阴性对照组相比较，心肌成纤维细胞活力明显下降；而瞬时转染miR-29a inhibitors 24、48 h后，心肌成纤维细胞活力则明显增强。结论 miR-29am imics可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性，而miR-29a inhibitors则显著提高心肌成纤维细胞的增殖活性，提示心肌纤维化的形成可能与miR-29a表达下调有关，其潜在的分子作用机制有待进一步研究。

microRNA-29a；心肌成纤维细胞；Col1A1；α-SMA；quantitative real-time PCR

网络出版时间：2016-3-8 8：29：01 网络出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160308.0829.016.htm l

心肌纤维化是心房颤动（atrial fibrillation，AF）的病理生理学基础，可导致心律失常的发生和持续［1］。心肌纤维化表现为细胞外基质（extracellular cellmatrix，ECM）和胶原蛋白的过度沉积，最终导致心肌功能的损害。在此过程中，心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）发挥着重要的作用，其活化增殖则是心肌纤维化的关键环节［2-3］。……