于 莉，吴 璇，汪旻旻，黄升海

◇经验与体会◇

呼吸道合胞病毒空斑形成实验的条件优化

于 莉，吴 璇，汪旻旻，黄升海

采用空斑形成实验方法测定呼吸道合胞病毒（RSV）的滴度，加入覆盖层倒置培养27、30、34、40 h后经固定染色、剔除覆盖层后，可见清晰透明空斑，边缘清晰、形态均为圆形或类圆形，空斑直径分别为1、1.5、3、5 mm左右。加入覆盖层后培养病毒的时间可以影响RSV最终所形成的空斑大小，并且随着时间的延长空斑逐渐增大，在30～34 h所形成的空斑大小最佳，易于计数。病毒的稀释度也会影响空斑最终形成的数量，且随着稀释度的增加，空斑数量逐渐减少。关键词 呼吸道合胞病毒；空斑形成实验；甲醛-结晶紫

网络出版时间：2016-3-8 8：29：02 网络出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160308.0829.064.htm l

呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）被认为是引起世界范围内婴幼儿严重下呼吸道感染最常见的病原体，也是引起免疫力低下患者和老年人下呼吸道感染的病原体之一［1-3］。因此RSV越来越受到重视，而对RSV致病机制的研究及抗RSV药物和疫苗的研发均需对RSV的滴度进行定量测定。国内外通常采用空斑计数对病毒进行滴度检测。该实验采用甲醛-结晶紫空斑法在原有的空斑形成实验方法上［4-5］，通过对营养覆盖物培养时间的改变，就RSV在人喉癌上皮细胞（human larynx carcinoma epithelial cell，Hep-2）上在培养时间及病毒稀释度改变的条件下所形成空斑的大小及数量进行研究，进而进行条件优化。拟达到相对较好的实验条件，能够更精确地对病毒滴度进行检测，并且重复性相对较好，为临床病程的判断提供更准确的参考信息。……