谢丽基，谢芝勋，黄　莉，邓显文，谢志勤，范　晴，罗思思，黄娇玲，曾婷婷

(广西壮族自治区兽医研究所 广西动物疫病病原生物学与诊断重点实验室，南宁 530001)



禽呼肠孤病毒σA和σNS蛋白激活PI3K/Akt信号通路的研究

谢丽基，谢芝勋*，黄莉，邓显文，谢志勤，范晴，罗思思，黄娇玲，曾婷婷

(广西壮族自治区兽医研究所 广西动物疫病病原生物学与诊断重点实验室，南宁 530001)

摘要：旨在探讨禽呼肠孤病毒(ARV)的σA和σNS蛋白是否是通过PXXP或YXXXM基序来激活PI3K/Akt信号通路的。作者采用重叠延伸PCR的方法，将σA和σNS基因的PXXP或YXXXM基序进行突变后构建了重组质粒，并在Vero细胞中进行了表达。通过流式细胞术和Western blot，检测转染后Vero细胞磷酸化Akt(P-Akt)的表达量，并与野生型σA和σNS蛋白激活的P-Akt表达量进行比较。结果显示，σA和σNS基因均得到了表达，σA基因的110—114和114—117位的PXXP基序突变后，Vero 细胞P-Akt 的表达量明显下降。可见，ARV的σA蛋白，是通过PXXP基序来激活PI3K/Akt信号通路的。本研究从细胞信号转导角度揭示了ARV与宿主相互作用的机制，也为寻找抗ARV药物作用靶标提供了新的思路。

关键词：禽呼肠孤病毒；PI3K/Akt信号通路；σA蛋白；PXXP基序

禽呼肠孤病毒(avian reovirus，ARV)主要引起鸡出现跛行、免疫抑制和总体生产性能下降(增重减少、饲料转化率低)，严重降低鸡的经济价值，成为危害养鸡业健康发展的重要传染病之一[1-3]。P.Y.Lin等[4]使用ARV感染Vero细胞后，通过Western blot检测磷酸化Akt(P-Akt)的表达量，从病毒的角度证实了ARV感染的早期激活了PI3K/Akt信号通路，但并未找到是ARV的哪个蛋白质激活PI3K/Akt信号通路。本课题组的前期研究工作发现，在Vero细胞中表达ARV的σA蛋白和σNS蛋白后，激活了PI3K/Akt信号通路[5]，从病毒蛋白质的角度证实了ARV激活了PI3K/Akt信号通路。……