王涛　温桂海　张桂东　李恩君　武向鹏　苑昭奖　王杰

(1.邯郸市中心医院普外一科，河北 邯郸 056001;2.重庆市中医院呼吸内科，重庆 400011)



N-乙酰半胱氨酸通过抑制HIF-1α下调肝癌HepG2细胞survivin和VEGF表达的实验研究*

王涛1温桂海1张桂东1李恩君1武向鹏1苑昭奖1王杰2

(1.邯郸市中心医院普外一科，河北 邯郸 056001;2.重庆市中医院呼吸内科，重庆 400011)

【摘要】目的探讨在低氧环境下N-乙酰半胱氨酸(NAC)能否通过抑制HIF-1α合成下调肝癌HepG2细胞survivin和VEGF的表达。方法将肝癌HepG2细胞分为3组，分别为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和NAC+低氧组(NAC+Hypoxia组)。在低氧环境下对肝癌HepG2细胞使用NAC进行干预，在不同时间点(0h、24h和72h)采用MTT法对HepG2细胞的活性进行检测；同时在干预24h后，使用qPCR法和western blot法对HepG2细胞survivin、VEGF和HIF-1α的mRNA和蛋白水平进行检测。结果低氧环境下肝癌HepG2细胞活性呈时间依赖性下降，差异有统计学意义(P<0.05)；且在各时间点与低氧组细胞相比较NAC+低氧组细胞活性下降更加显著，差异有统计学意义(P<0.05)。在低氧环境下24h后HepG2细胞survivin、VEGF和HIF-1α mRNA和蛋白表达较常氧环境下显著增加，差异有统计学意义(P<0.05)；但NAC+低氧组细胞survivin、VEGF和HIF-1α mRNA和蛋白的表达水平较低氧组细胞显著下降，差异有统计学意义(P<0.05)。结论低氧环境中N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以通过下调HIF-1α的合成抑制肝癌HepG2细胞survivin、VEGF的表达，并可有效抑制肿瘤细胞的增殖。该基础研究为NAC应用于肿瘤的临床治疗奠定了一定的理论基础。

【关键词】N-乙酰半胱氨酸；缺氧诱导因子-1α；survivin；血管内皮生长因子；HepG2细胞

由于肿瘤细胞增殖、分化和生长的无序性和肿瘤血管生成的异常，导致肿瘤特别是实体肿瘤组织内部出现不同程度的缺氧[1-5]。目前大量基础研究发现低氧(hypoxia)或者缺氧环境可成为诱导和促进肿瘤演进的重要因素[1-6]。并有研究认为缺氧相关的组织微环境在包括肝癌、非小细胞肺癌及直结肠癌等多种肿瘤细胞的增殖(proliferation)、侵袭(invasion)、分化(differentiation)、转移(metastasis)和肿瘤血管生成(angiogenesis)的过程中扮演着重要的角色[1-6]。同时进一步的实验发现缺氧诱导因子-1α (hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)对缺氧环境中的肿瘤细胞的生物学特性具有重要的调控作用[1-6]。多个研究表明抑制HIF-1α的表达或活化可以有效抑制多种肿瘤的血管生成和肿瘤细胞的增殖[1-6]。……