刘建化　马冬　陈少杰　练国达　李佳佳　黄开红



·论著·

胎盘生长因子基因沉默对胰腺癌PANC1细胞迁移和侵袭的影响

刘建化马冬陈少杰练国达李佳佳黄开红

510180广州，广东省医学科学院广东省人民医院胃肠肿瘤内科

【摘要】目的探讨胎盘生长因子(PIGF)基因沉默对人胰腺癌PANC1细胞迁移、侵袭能力及化疗药物耐药性的影响。方法设计并合成3个靶向PIGF的siRNA(siRNA-PIGF)，以非特异性的siRNA(siRNA-NC)作为转染的阴性对照，以未转染细胞作为空白对照。采用脂质体法将siRNA转染PANC1细胞，分别采用实时RT-PCR和ELISA法检测各组细胞PIGF mRNA及蛋白表达抑制率；MTT法检测化疗药物处理对各组细胞的生长抑制率；Transwell小室检测细胞的侵袭和迁移能力。结果转染3个siRNA-PIGF的PANC1细胞PIGF mRNA表达抑制率分别为(64.38±8.92)%、(70.48±7.72)%、(81.25±6.02)%，以转染siRNA-PIGF-3的基因沉默效应最佳。转染24 h后，siRNA-PIGF组细胞PIGF mRNA表达量较siRNA-NC组下降(63.72±8.20)%，较未转染组下降(75.07±8.25)%，差异均有统计学意义(P值均<0.05)；转染48 h后，培养上清液PIGF蛋白含量较siRNA-NC组下降(42.92±1.34)%，较未转染组下降(46.25±3.64)%，差异均有统计学意义(P值均<0.01)，而未转染组和siRNA-NC组间的差异无统计学意义。3 ng/L吉西他滨处理后，siRNA-PIGF组细胞的生长抑制率显著高于siRNA-NC组及未转染组[(44.35±5.05)%比(34.29±3.60)%、(31.01±1.08)%]，差异均有统计学意义(P值均<0.05)，而5-氟尿嘧啶或阿霉素处理后3组的生长抑制率差异无统计学意义。在细胞迁移和侵袭实验中，siRNA-PIGF组穿膜细胞数分别为siRNA-NC组的38.1%、28.2%，为未转染组的40.8%、36.2%，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论PIGF 基因沉默能显著抑制胰腺癌PANC1细胞的迁移与侵袭能力，能增强对化疗药物吉西他滨的敏感性。

【关键词】胰腺肿瘤；RNA，小分子干扰；胎盘生长因子；肿瘤浸润

Fund program: Science and Technology Commission Foundation of Guangdong Province(2013B021800233)

胰腺癌确诊时多属晚期，失去手术机会，且对化疗不敏感，预后差[1-2]。影响胰腺癌预后的诸多因素中，除了理化环境、诊治方法、分子生物学特征等，恶性肿瘤对周围组织的浸润和器官的转移与预后也密切相关[3-4]。因此，深入探讨胰腺癌侵袭与迁移的分子机制对提高胰腺癌疗效具有重要理论意义和临床指导价值。胎盘生长因子(placental growth factor，PIGF)是血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族重要成员，作为调控血管生长的重要因子，能促进新生血管形成，同时对巨噬细胞也有趋化、聚集作用[5]。它在多种恶性肿瘤的生长、侵袭、血管生成和免疫逃避中扮演重要的角色[6]，并与肿瘤放化疗敏感性降低有关，是抗肿瘤治疗的靶点之一。……