王桂志，张　永， 张　弛，许强华、2、3、4、5

（1.上海海洋大学海洋科学学院，上海201306；2.大洋渔业资源可持续开发省部共建教育部重点实验室，上海201306；3.农业部大洋渔业资源环境科学观测试验站，上海201306；4.国家远洋渔业工程技术研究中心，上海201306；5.远洋渔业协同创新中心，上海201306）



独角雪冰鱼和伯氏肩孔南极鱼TRPV1基因的克隆及低温适应功能检测

王桂志1，张永1， 张弛1，许强华1、2、3、4、5

（1.上海海洋大学海洋科学学院，上海201306；2.大洋渔业资源可持续开发省部共建教育部重点实验室，上海201306；3.农业部大洋渔业资源环境科学观测试验站，上海201306；4.国家远洋渔业工程技术研究中心，上海201306；5.远洋渔业协同创新中心，上海201306）

摘要：为从细胞水平上研究独角雪冰鱼Chionodraco hamatus和伯氏肩孔南极鱼Trematomus bernacchii的低温适应能力，采用RT-PCR方法，获得独角雪冰鱼和伯氏肩孔南极鱼的瞬时受体电位阳离子通道蛋白（transient receptor potential channels V1，TRPV1）基因序列，其开放阅读框全长均为2310 bp；生物信息学分析表明，两种南极鱼TRPV1基因均编码769氨基酸残基，预测其蛋白相对分子质量分别为88 210和88 160，理论等电点分别为7.63和8.26；两种南极鱼TRPV1蛋白均无信号肽；亚细胞定位显示，TRPV1蛋白主要在细胞膜和内质网中发挥生物学功能；理化性质分析表明，两种南极鱼的TRPV1为不溶性跨膜蛋白，分别有34、35个磷酸化位点和6、5个糖基化位点，二者均含有6个跨膜结构域、5个锚蛋白结构域，二级结构以随机卷曲为主；同源性分析显示，独角雪冰鱼TRPV1氨基酸序列与伯氏肩孔南极鱼的一致性最高，为93.4％，与其他物种的一致性为44.3％～69.8％；低温适应试验结果显示，两种南极鱼的TRPV1基因不能被温度所激活。……