汪秀会，宫晓倩，阮宝阳，2，刘晓敏，汪　琪，张　鹏，2，李泽君，周艳君，童　武，郑　浩，童光志*，于　海*

(1.中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241；2.山东农业大学动物科技学院，泰安 271000)



古典H1N1亚型猪流感病毒PB2 K627E突变对病毒复制能力的影响

汪秀会1，宫晓倩1，阮宝阳1，2，刘晓敏1，汪琪1，张鹏1，2，李泽君1，周艳君1，童武1，郑浩1，童光志1*，于海1*

(1.中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241；2.山东农业大学动物科技学院，泰安 271000)

摘要：旨在探索古典H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/Guangdong/1/2011(H1N1) PB2 K627E突变对病毒复制能力的影响。利用反向遗传操作技术和点突变技术成功获得古典H1N1亚型猪流感病毒的拯救株(627K)和突变株(627E)后，分别在MDCK细胞和小鼠体内对拯救株和突变株的复制能力进行比较。体外MDCK细胞试验结果显示，突变株与拯救株相比，细胞病变(CPE)减小、空斑形态减小、生长曲线差异极其显著，表明突变株在MDCK细胞上的复制能力减弱。小鼠攻毒试验结果表明，突变株对小鼠体重变化的影响不明显，在小鼠肺中的病毒滴度明显下降，引起病理损伤较轻。体外MDCK细胞及小鼠攻毒试验结果均表明，突变株与拯救株相比复制能力降低。该结果不仅证实了猪流感病毒 PB2 627位氨基酸是一种重要的毒力分子标记，同时还为进一步阐明其致病机制提供了条件。

关键词：古典H1N1亚型猪流感病毒；PB2 K627E突变；体外MDCK细胞试验；小鼠攻毒试验；复制能力

猪流感(swine influenza，SI)是由猪流感病毒(swine influenza virus，SIV)引起的以咳嗽、流涕、喷嚏、高烧、昏睡、呼吸困难和食欲下降等[1]为主要特征的猪的一种常见病。该病一年四季均可发生，并可继发或同时感染猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪伪狂犬、流行性腹泻等[2]，给养猪业造成了巨大的经济损失。……