贾艳艳，殷月兰，谈卫军，段斐斐，潘志明，陈祥，焦新安

扬州大学 江苏省人兽共患病重点实验室 江苏省动物重要疫病和人兽共患病防控协同创新中心，江苏 扬州 225009



减毒李斯特菌载体运送HPV16 E7基因重组疫苗的构建及其生物学特性

贾艳艳，殷月兰，谈卫军，段斐斐，潘志明，陈祥，焦新安

扬州大学 江苏省人兽共患病重点实验室 江苏省动物重要疫病和人兽共患病防控协同创新中心，江苏 扬州 225009

贾艳艳, 殷月兰, 谈卫军, 等. 减毒李斯特菌载体运送HPV16 E7基因重组疫苗的构建及其生物学特性. 生物工程学报, 2016, 32(5): 683–692.

Jia YY, Yin YL, Tan WJ, et al. Construction and characterization of an attenuated recombinant Listeria monocytogenes vector vaccine delivering HPV16 E7. Chin J Biotech, 2016, 32(5): 683–692.

摘 要:单核细胞增生李斯特菌 (Listeria monocytogenes, LM) 是一种理想的肿瘤疫苗载体，本文旨在构建表达人乳头瘤状病毒 (HPV) 16型 E7蛋白的减毒重组李斯特菌疫苗候选株并分析其生物学特性。利用同源重组技术将HPV16 E7基因定点整合至LM hly基因信号肽序列下游，获得减毒重组李斯特菌LM4△hly::E7，并对该重组菌进行生物学特性研究。实验结果表明，重组菌能够分泌表达具有免疫学活性的E7-LLO融合蛋白，大小约66 kDa；通过激光共聚焦扫描显微镜观察到重组菌能够在RAW264.7细胞胞内增殖。ELISA测定结果显示减毒重组菌能够诱导小鼠产生E7特异性抗体。重组菌在C57BL/6小鼠中LD50为3.863×109CFU，低于亲本株4个数量级，通过组织切片观察到重组菌对小鼠肝脏及脾脏无明显病理变化。以上表明，本研究构建的分泌表达E7-LLO融合蛋白的减毒重组李斯特菌具有较好的安全性，为下一步研究其抗肿瘤作用提供了材料，并为研发宫颈癌的免疫治疗型候选疫苗奠定重要基础。……