吴莹莹，丁跃明，毕　磊，田林波，王　敏，潘　云（大理大学临床医学院，云南大理　671000）



大理地区HPV感染与宫颈病变及相关危险因素关系初探

吴莹莹，丁跃明，毕磊，田林波，王敏，潘云*
（大理大学临床医学院，云南大理671000）

［摘要］目的：探讨大理地区妇女宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染亚型与宫颈病变及其流行病学特征的关系。方法：收集2011年7月至2014年9月在大理大学附属医院妇产科门诊病例，共2 053例，平均年龄为39.46岁，应用基因扩增及导流杂交技术进行基因亚型检测。TCT及病理检查方法对其进行病变类型检测。收集整理HPV阳性患者的年龄、民族、职业。结果：2 053例病例中阳性例数为308例，阳性率为15.00%。共检测出14种高危型：HPV16（28.90%）、HPV52（21.75%）、HPV58（12.99%）、HPV18（10.39%）、HPV68（4.22%）、HPV31（2.27%）、HPV66（3.25%）、HPV33（5.19%）、HPV39（5.52%）、HPV53（4.55%）、HPV59 （1.62%）、HPV56（0.65%）、HPV35（1.62%）、HPV51（2.60%）；5种低危型：HPV45、HPV42、HPV6、HPV11、81（cp8304）。HPV单一感染宫颈病变阳性率为21.95%（TBS）、50%（病理），多重感染宫颈病变阳性率为4.88%（TBS）、9.38%（病理）。阳性病例中有122例记录了民族，其中白族81例（66.39%），汉族27例，彝族6例，傈僳族4例，藏族2例，回族1例，纳西族1例。白族妇女中共检出8种基因亚型。职业主要分为务农人员（52.70%），非务农人员（职员、公务员及自由职业者等）（47.30%）。结论：大理地区HPV感染高危型以16型、52型、58型、18型最常见，多重感染并不增加宫颈癌的发生。HPV病例构成比较高的年龄段为30～52岁，阳性率较高的年龄段为≥62岁。白族妇女中较常见的HPV基因亚型为HPV52型、16型、58型、18型。HPV感染亚型分布具有一定的地域、年龄及民族特点。

［关键词］人乳头瘤病毒感染；宫颈病变；基因亚型；病理；宫颈脱落细胞学

［DOI］10. 3969/j. issn. 1672-2345. 2016. 02. 006

子宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，其发病率仅次于乳腺癌，位居女性恶性肿瘤第2位，国内外大量的研究发现宫颈癌的高危因素排名前4位为：人乳头瘤病毒（HPV）感染，人流次数，宫颈炎，首次性交年龄〔1〕。国际癌症研究中心专题讨论会（1995年）明确提出HPV感染是宫颈癌的主要危险因素〔2〕，HPV基因亚型主要分为两种：高危型和低危型，其中高危型HPV持续感染为宫颈癌变的必要条件之一。通过研究人员对HPV感染与宫颈病变关系的研究发现，HPV基因分型具有一定的流行病学分布特点。本文通过回顾性研究收集资料分析大理地区妇女HPV感染亚型与宫颈病变的关系，以及HPV感染的年龄、民族、职业特点。

1　研究对象及研究方法

1.1一般资料收集2011年7月至2014年9月在大理大学附属医院妇科门诊病例2 053例，应用基因扩增及导流杂交技术进行基因分型检测、新柏氏基液细胞学检测（TCT）及病理检查方法进行病变类型检查的病例进行回顾性分析研究。

1.2试剂HPV基因亚型检测应用人乳头状瘤病毒（HPV）分型检测试剂盒（PCR+膜杂交法）（潮州凯普生物化学有限公司），该试剂盒系由HPV核酸扩增试剂、HPV杂交检测试剂等组成，采用基因扩增技术及导流杂交原理，通过反向点杂交检测扩增产物与包被有型特异性探针膜杂交结果，采用碱性磷酸酶系统定性检测，从而对HPV基因型进行分型检测，可检测出16种高危型HPV基因：HPV16、18、31、33、35、39、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68，以及5种低危型HPV基因：HPV6、11、42、43、cp8304（81）。

1.3方法对HPV感染阳性的妇女进行宫颈/阴道细胞学（TBS）或病理组织学检查（以自愿为原则），共有82例进行TCT检测，64例进行病理学检查。对阳性病例的流行病学指标（年龄、民族、职业）进行整理、筛选、分析。统计学分析均应用SPSS17.0系统进行。

2　结果

进行基因分型检测的2 053例病例，HPV阳性例数为308例，阳性率为15.00%，共检出19种基因亚型，其中高危型14种，低危型5种。基因亚型为前4位HPV16占28.90%（89/308）、HPV52占21.75% （67/308）、HPV58占12.99%（40/308）、HPV18占10.39%（32/308）。见表1。

表1　大理地区308例HPV基因亚型构成比

HPV单一型别感染率为12.03%（247/2 053），在阳性病例的构成比为80.19%（247/308），多重感染型别（包括双重，三重及以上感染）的感染率为2.97%（61/2 053），构成比为19.81%（61/308）。TCT结果中TBS分类高于非典型鳞状细胞（ASC-US）则为宫颈病变阳性，病理检测结果中病变类型高于低度鳞状上皮内病变（CIN1）则为宫颈病变阳性，单一感染宫颈病变阳性率分别为21.95%（18/82）、50% （31/64），多重感染宫颈病变阳性率分别为4.88%（4/ 82）、9.38%（6/64），进行统计学分析，P<0.01差异有统计学意义。见表2、3。

表2　单一感染及混合感染HPV型别情况

表3　不同型别感染对应TBS及病理学检查情况

通过对HPV阳性病例进行年龄分组（年龄在19岁到71岁，平均年龄为39.9岁，以10岁为区间，共分为5组（19～30岁，30～41岁，41～52岁，52～63岁，≥63岁），对其进行分析，在30～41岁，41～52岁这两个年龄段，构成比较高分别为39.54%（122/308）、38.89%（119/308）。经统计学分析，P<0.05，差异具有统计学意义。≥63岁年龄段的阳性率较高为26.92%，构成比为2.27 %。见表4。

对阳性并记录民族（122例）病例进行整理分析，白族有81例，占66.39%，汉族有27例，占22.13%（见表3）。之后对这些白族、HPV感染阳性的病例进行基因亚型分析，共检出8种基因亚型：52型（21例），16型（18例），58型（11例），18型（9例），39型（8例），33型（7例），66型（5例），68型（2例）。

表4　年龄分组及民族分布与HPV感染

职业分布，包括务农人员、职员、公务员及自由职业等多种职业，其中务农人员所占比例为52.70%，非务农人员占48.30%。

3　讨论

通过近几年对HPV亚型感染与宫颈病变的研究发现，HPV亚型分布具有一定的地理性，在世界范围内，以16型最多，其次为18型，45型，31型，33型，拉丁美洲以33型最常见，其次为39型和59型〔3〕，亚洲国家中，除16型、18型外，58型，52型引起宫颈癌所占比例较西方国家及非洲国家多〔4-5〕。北京地区常见基因亚型依次为16型、58型、52型、33型〔6〕。李军等〔7〕研究结果显示西安地区育龄妇女以16型、58型、18型、66型、33型比较常见。Li等〔8〕研究发现成都地区宫颈癌中最主要的感染亚型为HPV 16型、58型、18型、52型。本文首次对大理地区妇女HPV基因亚型做了调查，发现大理地区HPV感染亚型分布与我国境内其他地区相比较，HPV感染常见基因亚型有一定差异，大理地区常见HPV基因亚型为16型、58型、52型、18型。符合亚洲地区HPV基因亚型感染的特点。HPV多重感染与宫颈癌病变发生的关系一直是学者们关注的问题，有人认为高度鳞状上皮内瘤变更趋向多重感染，HPV双重、多重感染增加，导致宫颈病变程度加重，但是通过大量流行病学调查发现，多重感染并不增加宫颈癌的发生。本研究对单一感染与多重感染宫颈病变阳性率分析，具有统计学差异，支持单一感染比多重感染更增加宫颈病变发生机率，初步结果显示多重感染并不增加宫颈癌的发生。

国内外大量研究显示不同年龄段HPV感染率存在差异。范洁琳等〔9〕研究发现湖南湘雅地区大于60岁妇女HPV感染率最高，原因可能与该年龄段患者体检意识较差，有临床症状后才到医院检查，或是由于机体免疫力较差等有关。有研究发现围绝经期间（50～59岁）HPV感染率较高，大于60岁开始下降，原因可能与人体内雌孕激素水平变化影响宫颈上皮的化生过程，增加了宫颈HPV感染率。本研究结果提示大理地区妇女HPV感染中构成比较高的年龄段为30～52岁，但阳性率无明显差异，可能与该年龄段妇女有意识的进行妇科常规查体，总体基数较大，相对其他构成比较高有关。≥63岁年龄段的阳性率较其他年龄段高。与范洁琳等的研究相符。陈志芳等〔10〕对西北地区，包括新疆汉族、维吾尔族、哈萨克族在内的妇女进行HPV调查发现，主要以HPV 16型、58型、18型、52型、31型最常见，大理州共有21个民族，分别是：汉、白、彝、回、傈僳、苗、纳西、壮等民族。其中又以汉族和白族居多，在本研究中白族和汉族HPV感染率最高，白族所占比例为66.39%（81/122），在本研究中发现白族中常见的HPV基因亚型为52型、16型、58型、18型，与大理地区的整体基因亚型分布相符。

Winer等〔11〕研究发现，性交并不是必须的传播途径，环境污染传播和垂直传播等可能是HPV传播的潜在途径。吴瑞芳等〔12〕研究结果提示HPV感染率存在职业差异。通过本研究发现HPV阳性病例中务农人员占一半以上的比例（59.22%），提示大理地区女性职业对HPV感染率有一定影响，导致这一结果的原因可能与患者生活的环境和个人卫生习惯等有关。

综上所述，本次研究发现大理地区妇女感染HPV基因亚型具有一定的年龄、民族、职业等特点，总体上符合亚洲地区HPV基因亚型感染的特点，本地区应重视HPV16型、58型、52型和18型感染的防治。本研究初步提示多重感染并不增加宫颈癌的发生。但本研究仍有些不足，虽然基础研究样本量很大，但是没有追踪对每位HPV感染阳性病人进行TCT以及病理学检查，导致研究TCT及病理学检查结果的样本量较少，不利于观察HPV阳性病人的病情变化。

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（责任编辑董杰）

Relashionship between HPV Infection and Cervical Lesions and Associated Risk Factors in Dali

Wu Yingying, Ding Yueming, Bi Lei, Tian Linbo, Wang Min, Pan Yun*
（Clinical College, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China）

〔Abstract〕Objective: To explore the relationship between Dali women with cervical human papillomavirus（HPV）infection and disease subtypes and epidemiological characteristics of the cervix. Methods: Samples of the obstetrics and gynecology outpatients from July 2011 to September 2014 at the Affiliated Hospital of Dali University were collected. 2 053 cases with an average age of 39.46 years were undertaken the detection of subgenotypes diversion by gene amplification and hybridization techniques. TCT and pathological examination method was used to the type of lesion detection. HPV-positive patients were collected according to the age, nationality and profession. Results: Positive cases were 308 and the positive rate was 15.00%. 14 kinds of high-risk were detected: HPV16（28.90%）, HPV52（21.75%）, HPV58（12.99%）, HPV18（10.39%）, HPV68（4.22%）, HPV31（2.27%）, HPV66（3.25%）, HPV33（5.19%）, HPV39（5.52%）, HPV53（4.55%）, HPV59（1.62%）, HPV56（0.65%）, HPV35（1.62%）, HPV51（2.60%）. 5 kinds of low-risk types were: HPV45, HPV42, HPV6, HPV11,81（cp8304）. HPV infection in cervical lesions single positive rate were 21.95%（TBS）, 50%（pathology）, and multiple infections cervical lesions positive rate 4.88%（TBS）, 9.38%（pathology）. 122 positive cases were recorded nationalities, including 81 Bai cases（66.39%）, 27 Han, 6 Yi, 4 Lisu, 2 Tibetan, 1 Muslim and 1 Naxi. Bai women were detected eight kinds of subgenotypes. The occupations were farmers（52.70%）and non-farmers（employees, civil servants and freelancers, etc.）（47.30%）. Conclusion: Most common types of HPV infection in Dali were 16, 52, 58, 18. And multiple infection did not increase the incidence of cancer. HPV cases constituted a relatively high age group of 30 to 52 years old, and a high positive rate is≥62 years of age. The common genetic subtypes in Bai women were HPV type of 52, 16, 58, 18. HPV infection with certain subtypes were characterized by geography, age, and ethnic characteristics.

〔Key words〕human papillomavirus infection; cervical lesions; subtypes; pathology; cervical cytology

［中图分类号］R711.74

［文献标志码］A

［文章编号］1672-2345（2016）02-0023-04

［收稿日期］2015-03-26［修回日期］2015-07-20

［作者简介］吴莹莹，硕士研究生，主要从事头颈部肿瘤基础与临床研究.

*通信作者：潘云，教授．