张雷

620500　四川省仁寿县计划生育服务站检验科



·论著·

酶联免疫吸附试验法在孕前TORCH 3项病原体感染检测中的效果及意义

张雷

620500四川省仁寿县计划生育服务站检验科

【摘要】目的研究酶联免疫吸附试验法在孕前TORCH 3项病原体感染检测中的效果及意义。方法选取2014年1月至2015年2月进行孕期检测的孕妇1 178例，使用酶联免疫吸附试验检测TORCH-IgM 抗体及TORCH-IgG 抗体。若筛查出感染患者，根据具体症状进行治疗。观察孕妇TORCH 感染状况、孕妇TORCH 病原体同时感染情况、孕妇妊娠结局及治疗效果。结果1 178例孕妇中，52例TORCH 特异性抗体IgM 感染，其中T-IgM 感染(1.27%)15例，R-IgM 感染(0.76%)9例，C-IgM 感染(2.38%)28例，其中R-IgM 抗体阳性率较低，C-IgM 抗体阳性率相对较高。T-IgG 感染(4.16%)49例，R-IgG 感染(88.28%)1 040例，C-IgG 感染(92.95%)1 095例，其中R-IgG 抗体阳性率较低，C-IgG 抗体阳性率相对较高。1 178例孕妇，未见血清多重抗体IgM 阳性。TORCH 特异性抗体IgG 阳性主要为RV、CMV 阳性，共61例，阳性率5.18%。52例TORCH 感染孕妇中，终止妊娠8例，继续妊娠44例。不良妊娠结果19例，发生率43.18%，其中以流产发生率最高，为34.09%(15/44)。对TORCH 感染患者的治疗效果进行分析，其中TOX患者中，第1疗程治愈3例，RV患者中，第1疗程治愈7例，CMV患者中，第1疗程治愈6例。结论酶联免疫吸附试验法检测孕前TORCH 3项病原体感染可早期发现，早期治疗，必要时终止妊娠，避免有缺陷的儿童的降生，减轻家庭负担，提高人口素质，值得临床推广应用。

【关键词】酶联免疫吸附试验法；孕前；TORCH 3项病原体；检测

TORCH为病原微生物的英文缩写词组，T表示弓形虫(Toxopasma，TOX)，O 表示包括梅毒螺旋体在内的其他病原体，R表示风疹病毒(Rubella.Virus,RV)，C表示巨细胞病毒(Cytomegalo.Virus,CMV)，H表示单纯疱疹病毒(Herpes.Virus)；TORCH微生物的主要特征为母婴感染[1]。研究表明，在TORCH病原体中，四种为产生畸形胎儿的主要因素[2]。妊娠前3个月为胚胎形成期，若母体受到TORCH 感染，可使细胞分裂受到影响，出现流产、畸胎等；若妊娠3个月后受到感染，可使胎儿器官结构受到影响，产生病变，导致智障等疾病，不利于胎儿的生长发育及家庭和谐[3]。因此，为了确保优生优育，减少智障等儿童的出现，TORCH 感染病原体的筛查具有十分重要的意义。应在妊娠早期对确认TORCH 感染的孕妇进行停止妊娠的工作，保证胎儿的健康[4]。近年来，上级卫生部门要求辖区筛查育龄女性一系列免费孕前优生项目，同时将孕前保健档案建立起来，其中TORCH3项就包含其中。为了将有效方法提供给临床对孕前TORCH 3项病原体感染的检测，尽可能早地将孕前TORCH 3项病原体感染寻找出来，为提升人口素质提供良好的前提条件，2014年1月至2015年2 月，我们使用酶联免疫吸附试验法对前来就诊的孕妇进行检测，报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取2014年1月至2015年2月收入我站进行孕期检测的孕妇1 178例，孕周5～18周，年龄19～40 岁，初产妇866例，经产妇312例。

1.2标本收集清晨空腹收集孕妇3 ml肘静脉血，离心，1 h内收集血清，4℃冰箱保存，并于当天进行TORCH特异性抗体检测。

1.3检测方法使用酶联免疫吸附试验检测TORCH-IgM 抗体及TORCH-IgG 抗体。试剂盒由北京科瑞美科技有限公司提供。由专业人员严格按说明书进行实验操作。使用MK3 酶标仪比色，450 nm 测定各孔吸光度值(OD)。

1.4结果判断以Cut off 值作为临界值(cut off值= 阴性对照OD 平均值+0.1)[5]，若临界值大于测定标本OD 值则为阴性，若临界值小于测定标本OD 值则为阳性。若检测为阳性，则1周后使用同样方法复查，若结果仍为阳性，则确定为阳性。

1.5测定质量控制测定样品时需进行质控评判，设空白对照、阴性对照及阳性对照各3孔，测定质控品和血清。TORCH-IgM、IgG 质控品CV在15%～25%。

1.6治疗方法若筛查出感染患者，根据具体症状进行治疗。(1)若感染者无流产征象，则可使用优生教育，同时行负压吸宫术治疗。(2)若感染者有先兆流产征象，则行清宫术治疗。(3)药物治疗：术后使用螺旋霉素治疗T-IgM阳性者，每次0.2 g，3次/d，2周为1个疗程，间隔2周再服用1个疗程后复查；使用抗感染药物进行对症治疗，R-IgG 阴性者及时注射风疹疫苗。C-IgM阳性者使用细胞增殖免疫疗法，加转移因子治疗，5 周后复查。

2结果

2.1TORCH感染状况分析1 178例孕妇中，52例TORCH 特异性抗体IgM 感染，其中T-IgM 感染15例(1.27%)，R-IgM 感染9例(0.76%)，C-IgM 感染28例(2.38%)，其中R-IgM 抗体阳性率较低，C-IgM 抗体阳性率相对较高。T-IgG 感染49例(4.16%)，R-IgG 感染1 040例(88.28%)，C-IgG 感染1 095例(92.95%)，其中R-IgG 抗体阳性率较低，C-IgG 抗体阳性率相对较高。见表1 。

表1　育龄女性血清TORCH 3 项特异性IgM、IgG抗体检测结果

2.2孕妇TORCH 病原体同时感染情况分析1 178例孕妇，未见血清多重抗体IgM阳性。TORCH 特异性抗体IgG 阳性主要为RV、CMV 阳性，共61例，阳性率5.18%。

2.3TORCH感染孕妇妊娠结局52例TORCH 感染孕妇中，终止妊娠8例，继续妊娠44例。不良妊娠结果19例，发生率43.18%，其中以流产发生率最高，为34.09%(15/44)。见表2 。

表2　44例TORCH 感染继续妊娠的妊娠结局　例

2.4TORCH 治疗效果分析对TORCH 感染患者的治疗效果进行分析，其中TOX患者中，第1疗程治愈3例，RV患者中，第1疗程 治愈7例，CMV患者中，第1疗程治愈6例。见表3 。

表3　TORCH 治疗效果分析　例

3讨论

TORCH为一类病原微生物的简称，可通过母体胎盘或产道传播给婴儿，引起胎儿流产、畸形、死亡等。TOX为弓形虫，人畜共患，宫内感染后可引起胎儿脑积水、畸形、钙化、脑瘫、发育迟缓等症状[6]；RV 为风疹病毒，主要经呼吸道传染，宫内感染后可引起病毒血症，使孕妇早产、流产，胎儿畸形甚至死亡等[7]；CMV 为巨细胞病毒，是最常见的宫内感染病原体，感染后易产生器官发育缺陷[8]。TORCH 病原微生物感染后，长期潜伏在人体内，怀孕期间，孕妇体内T细胞介导的细胞免疫受到影响，使孕妇抵御感染的能力降低，因此，感染TORCH后可能会引起孕妇宫内感染。TORCH中任意病原体感染孕妇后，大多孕妇自身症状不明显，但会对胎儿产生严重的不良后果。因此，为降低母婴传播TORCH的概率，多对孕早期孕妇进行TORCH病原体筛查。

病原体筛查中，主要以实验室诊断为标准，主要诊断方法包括：(1)病原体的分离筛查法：该方法准确性好，但该法用时较久，所需条件较苛刻，易受各种因素影响，一般的实验室较难开展[9]。(2)PCR 法：PCR法灵敏度较高，用时较短，可直接对病原体进行检测，但试剂及操作条件要求较高，限制了其广泛应用。(3) 酶联免疫吸附法：即ELISA 酶免诊断法，具有稳定性好，灵敏度高，特异性好的特点，加之成本较低，因此在基层医院得到了广泛使用，为国际公认的方便、可靠的早期筛查TORCH 感染的方法。一般主要使用酶联免疫吸附实验检测TORCH病原体特异性IgG 和IgM，以此确诊孕妇和胎儿是否受到感染。血清IgM 主要存在于感染后3～7 d，一般在血清内保持3个月左右，阳性IgM为急性感染及复发的重要指标；血清IgG抗体主要在感染后15 d左右出现，血清内保持时间较长，阳性IgM为机体层受过感染的重要指标；若IgM、IgG 同时阳性，则为近期感染的重要指标[10]。

本研究使用酶联免疫吸附试验法对收入我院的孕妇进行TORCH 特异性抗体IgM、IgG 检测，筛查出52 例3种病原体特异性IgM 抗体阳性孕妇，从感染情况看，CMV(2.38%)>TOX(1.27%)>RV(0.76%)，与陶洪群等[11]报道相似。特异性IgG 抗体的阳性检出率CMV(92.95%)、RV(88.28%)、TOX(4.16%)，CMV、RV IgG抗体检出率较高，但TOX检出率较低。IgG 检出率表明孕妇存在既往感染史，一般情况下TOX、RV IgG 阳性表明机体免疫力较好，但CMV抗体潜伏时间长，一旦感染则会终身携带[12]。本研究中孕妇中TORCH IgG 多重阳性较高，尤其是RV、CMV，表明本院所在区域人群易受上述两种病原微生物的感染，血清IgG 抗体较多，但妊娠引起的免疫抑制会增加病毒复发的机会，引起孕妇血清IgM 阳性率增加。因此，可通过孕前筛查，了解女性免疫情况，对易感女性接种相应疫苗，从而有效预防TORCH 感染。

随访妊娠结局表明，52例TORCH 感染孕妇中，终止妊娠8例，继续妊娠44例。不良妊娠结果19例，发生率为43.18%，其中以流产发生率最高，为34.09%(15/44)。回顾性分析TOX 孕妇表明，7例TOX阳性孕妇中，5例与动物曾有过异常接触，因此对该类人群的筛查对预防TORCH疾病十分重要。本研究还对TORCH 感染孕妇进行系统治疗，对TORCH 感染患者的治疗效果进行分析，其中TOX患者中，第1疗程治愈3例，RV患者中，第1疗程治愈7例，CMV患者中，第1疗程治愈6例。

TORCH病原体引发宫内感染的途径可以是通过胎盘，一方面对母体造成危害，另一方面还会严重危害胎儿，引发不良妊娠，会导致胎儿一系列后遗症，如一定程度畸形、智力障碍等[13]。计划生育、优生优育是我国的基本国策，对我国提升人口素质及实现民族兴旺产生直接而深刻的影响。由于我国具有较大的人口基础、较高的人口出生率，相关调查结果表明，现阶段，在我国，先天性感染TORCH疾病的存活患儿达到了26 000 例左右[14]。畸形儿、低智儿将极为沉重的精神及经济负担带给了家庭及社会，同时也折磨着患儿及其家属的身心。在促进人口素质提升的过程中，促进畸形儿、低智儿出生率的降低具有极为重要的临床意义，因此，临床很有必要筛查育龄女性孕前TORCH感染。妊娠前接受优生咨询指导、特异性治疗感染者、怀孕前保证感染指标转阴一方面能够对病毒感染胎儿的现象进行有效的避免，另一方面也能够对育龄女性的身心健康进行切实有效的保护[15]。对存在TORCH 感染史、动物接触史的女性应进行早期TORCH 筛查，应以预防为主、做好优生教育，向民众普及TORCH 感染的意义及危险性。目前主要预防措施包括：(1)备孕期间避免与猫、犬等宠物异常接触，不适用未完全煮熟的肉类，注意卫生情况，尽量避免TOX感染；(2)鼓励孕前3～6 周进行TORCH 筛查，孕前接种疫苗，预防风疹；(3)鼓励育龄女性自觉进行TORCH 感染筛查，早期发现，早期治疗，必要时终止妊娠，避免有缺陷的儿童的降生，减轻家庭负担，提高人口素质。

综上所述，酶联免疫吸附试验法检测孕前TORCH 3项病原体感染可早期发现，早期治疗，必要时终止妊娠，避免有缺陷的儿童降生，减轻家庭负担，提高人口素质，值得临床推广应用。但本研究纳入病例较少，未能完全排除其他因素，酶联免疫吸附试验法在孕前TORCH 3项病原体感染检测中的效果及意义仍需大量病例数目，多种研究方法证实。

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doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.11.026

【中图分类号】R 715

【文献标识码】A

【文章编号】1002-7386(2016)11-1685-03

(收稿日期：2015-12-09)