自噬在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化过程中的作用研究
2016-06-13邱翠婷郑海军余文军李爱琴李寰吕安林
邱翠婷,郑海军,余文军,李爱琴,李寰,吕安林
自噬在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化过程中的作用研究
邱翠婷,郑海军,余文军,李爱琴,李寰,吕安林*
摘要
目的:探讨自噬在高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化过程中的作用。
方法:采用磷酸盐(3.2 mmol/L Pi,即高磷状态)建立大鼠VSMC钙化模型。实验分为三组:对照组、钙化组(分为3个亚组:3.2 mmol/L Pi 4 d组、3.2 mmol/L Pi 6 d组、3.2 mmol/L Pi 8 d组);钙化+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(3.2 mmol/L Pi 8 d+5 mmol/L 3-MA)。分别通过茜素红S染色法和邻甲酚肽络合酮比色法检测各组细胞钙结节形成及钙含量;蛋白免疫印迹法检测各组细胞转录因子蛋白(Runx2)、α-肌动蛋白(α-SMA)和自噬相关蛋白—膜型微管蛋白1轻链3β(LC3Ⅱ)蛋白表达量。透射电子显微镜观察VSMC内自噬小体形成情况。免疫荧光显微镜下观察VSMC中LC3和Runx2定位表达。
结果:与对照组相比,3.2 mmol/L Pi 8 d组钙结节、钙含量、Runx2和LC3Ⅱ蛋白表达量及自噬小体均显著增高,α-SMA蛋白表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与3.2 mmol/L Pi 8 d组相比,钙化+3-MA组细胞钙含量增多,LC3荧光分布量降低,Runx2阳性细胞数增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:自噬在磷酸盐诱导的VSMC钙化过程中具有保护作用。
关键词自噬;磷酸盐类;肌,平滑;钙质沉着症
作者单位:454000河南省,焦作市人民医院心内科(邱翠婷、郑海军、李爱琴);中国人民解放军517医院内科(余文军);中国人民解放军第四军医大学第一附属医院心内科(李寰、吕安林)
(Chinese Circulation Journal,2016,31:484.)
线粒体是细胞内活性氧的主要来源,当细胞受到损伤时,线粒体的电子传递链发生异常,可能会导致活性氧簇(ROS)的进一步积聚和线粒体的损伤。……
