程静怡，黄兰芳

（1.中南大学护理学院；2.中南大学化工学院：长沙 410083）

蔓性千斤拔，分布在中国南部及西南部[1]。具有壮腰健肾、活血通络和消瘀解毒等功效，用于治疗风湿骨痛、腰肌劳损、跌打损伤和妇女白带多等症[2]。千斤拔含有黄酮类、糖类和挥发油等活性成分，具有较强的药理活性，因而研究千斤拔化学成分有很重要的意义[3-7]。本研究采用加速溶剂萃取法提取千斤拔化学成分，用GC-MS结合化学计量学分辨法对其化学成分进行研究，以期为千斤拔的进一步开发和药理药效研究奠定物质基础[8-12]。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

Shimadzu 2010型气相色谱-QP2010型质谱联用仪（GC-MS），电子天平（FR2202CN），ASE200快速溶剂萃取仪，RapidVap N 2/48氮气蒸发器。

蔓性千斤拔购于长沙药店，二氯甲烷为分析纯，二次水为实验室自制。

1.2 提取方法

将2.0 g千斤拔适当破碎后，放入ASE200快速溶剂萃取仪的萃取池中，用二氯甲烷进行萃取，选定萃取温度185℃，泵入萃取池溶剂量为池体积的100%，萃取30 min，将萃取后得到的提取液用快速浓缩仪浓缩到约1.5 mL。

1.3 GC-MS分析条件

OV-101石英毛细管色谱柱30 m×0.25 mm，液膜厚度0.25 μm，分流体积比10:1，汽化温度280℃，接口温度230℃。程序升温：起始温度50℃，维持8 min，以8℃/min升至250℃，维持10 min；载气为氦气，体积流量0.6 mL/min。离子源为EI，离子源电子能量70 eV，离子源温度230℃；倍增电压1.20 kV；扫描范围40～600 amu，扫描速率0.2 s/次。

1.4 数据分析

数据分析在Intel Pentium IV计算机上进行，所有程序用Matlab 6.5编写。应用HELP法对二维数据进行解析以得到各组分的纯色谱和质谱[9]；用所分辨的质谱在NIST标准质谱库中进行检索以定性分析，采用总体积积分和归一化法对各化合物的相对含量进行分析。

2 结果与讨论

2.1 定性分析

在上述GC-MS条件下，获得千斤拔二氯甲烷提取物化学成分的总离子流谱如图1。

由图1可知，提取物为一个复杂的分析体系，尽管优化了色谱条件，但也有些色谱峰出现重叠现象，如用NIST质谱库直接定性则相似程度很低。采用HELP法对所有重叠峰进行分辨，定性准确度显著提高[9]。

图1 千斤拔二氯甲烷提取物的色谱总离子流谱Fig 1 The TIC of dichloromethane extracts of Fleningia philippinensis

以峰簇C（t=11.70～11.95 min）为例来说明数据处理过程。经PCA法扣除背景和基线漂移后，用固定尺寸窗口渐进因子分析法（FSMWEFA）获得秩图[10]。依秩图用HELP法直接分辩峰簇C中各组分纯质谱，得到各组分纯质谱后，可获其纯色谱，如图2。

图2 峰簇C原色谱和分辩后色谱Fig 1 The original TIC(A)and the resolved chromatogram of cluster C(B)

由图2可知，用NIST质谱库定性，1和2分别为2,5-二丁基呋喃和乙酸龙脑酯，相关系数分别为0.961和0.947，而3因相关系数太低而未能定性。同样地，采用类似方法得到其它组分定性结果，结果如表1。

2.2 定量分析

在解析出各组分的纯色谱和质谱以后，采用总体积积分和归一化法得到各组分的定量结果，定量组分占总质量的89.41%，结果也列于如表1。其中长叶烯、香芹酚、杉木烯和橘烯含量依次最高。

3 结论

以二氯甲烷为溶剂，采用加速溶剂萃取法提取千斤拔化学组分，提取物用GC-MS检测，结合化学计量学组合方法，对其化学组分进行系统研究。与单纯采用相似度匹配来处理数据的方法相比，定性定量结果的准确度显著提高。共分辨出73个色谱峰，其中得到54个组分的定性结果，定性组分含量占总质量的89.41%。

千斤拔二氯甲烷提取物中主要组分为烯类和酚类，主要组分为长叶烯、香芹酚、杉木烯和橘烯等。方法简便快速，所得结果能为千斤拔样品指纹图谱建立提供基础，以用于千斤拔的识别和质量控制，也为开发和利用该千斤拔提供科学依据。

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