杨玉莹，陈华新，徐云峰，姜鹏，赵瑾，陈亮*

1(厦门大学 生命科学学院，福建 厦门，361102)　2(中国科学院海洋研究所，实验海洋生物学重点实验室，山东 青岛，266071)　3(青岛海洋科学与技术国家实验室海洋生物学与生物技术功能实验室，山东 青岛，266071)　4(黄岛出入境检验检疫局，山东 青岛，266555)



基因工程大肠杆菌生产重组别藻蓝蛋白(holo-SA-apcA)发酵条件优化

杨玉莹1，陈华新2,3*，徐云峰4，姜鹏2,3，赵瑾2,3，陈亮1*

1(厦门大学 生命科学学院，福建 厦门，361102)2(中国科学院海洋研究所，实验海洋生物学重点实验室，山东 青岛，266071)3(青岛海洋科学与技术国家实验室海洋生物学与生物技术功能实验室，山东 青岛，266071)4(黄岛出入境检验检疫局，山东 青岛，266555)

摘要利用Design-Expert 8.0软件，对大肠杆菌产重组别藻蓝蛋白(holo-SA-apcA)的发酵条件进行优化。首先运用Plackett-Burman两水平设计，对影响重组蛋白表达量的8个因素进行评价，选择有显著影响的3个因素，即pH值、诱导温度、接种量。在此基础上，再用最陡爬坡实验快速逼近以上3个因素的最大响应区域，最后经过Box-Behnken设计和响应面分析，通过求解回归方程得到最优条件为：pH 8.0、诱导温度18 ℃、接种量4%。在此条件下重复发酵实验3次，重组蛋白表达量达52.3 mg/L，与预测值基本一致。

关键词别藻蓝蛋白；大肠杆菌；Plackett-Burman设计；优化

别藻蓝蛋白(allophycocyanin)是藻类中一类重要藻胆蛋白，它与藻红蛋白、藻蓝蛋白和连接蛋白等一起构成藻胆体，吸收太阳光能用于光合作用。每分子的别藻蓝蛋白含有2条结构相似的多肽链α和β，α亚基和β亚基分别含有约160～180个氨基酸残基，二者的比例通常为1∶1，每个亚基上分别共价连接有1个藻胆色素分子。……