刘震凌　王佳楠



HPLC法测定米格来宁片中安替比林与咖啡因的含量

刘震凌王佳楠

【摘要】目的 用HPLC法同时测定米格来宁片中安替比林与咖啡因的含量。方法 采用 Waters C(18)色谱柱；以乙腈-水（20：80）为流动相；检测波长为273 nm。结果 安替比林进样量在0.014 12～0.706 20 μg、咖啡因进样量在0.002 79～0.139 60 μg，均与峰面积呈良好的线性关系，安替比林、咖啡因的平均回收率与RSD分别为99.7%、0.6%，100.0%、0.5%（n=9）。结论 该方法简便、准确，专属性强，重现性好，可用于该制剂的质量控制。

【关键词】米格来宁片；HPLC法；安替比林；咖啡因

作者单位：130033长春，吉林省药品检验所化学室

米格来宁片又名安比咖片，主要由安替比林与咖啡因组成的复方制剂，为解热镇痛药，主治偏头痛。原标准采用三氯甲烷萃取咖啡因，以排除安替比林的干扰，方法操作繁琐，结果误差大，且易造成污染环境，因此建立HPLC法同时测定安替比林和咖啡因，方法简便、准确［1］。

1　仪器与试药

Agilent1100高效液相色谱仪。安替比林对照品批号：100506-200301，咖啡因对照品批号：171215-200809（含量为99.9%），均为含量测定用，购自中国食品药品检定研究院；乙腈为色谱纯，甲醇为色谱纯，水为纯化水。

2　方法与结果

2.1色谱条件与系统适用性

色谱柱：Waters C18（4.6×250 mm，5 µm）；流动相：乙腈-水（20：80）；流速： 0.8 ml/min；柱温：35℃；检测波长：273 nm；进样量：20 µl。理论板数按安替比林峰计算不低于5 000，安替比林峰与咖啡因峰的分离度应符合要求。出峰顺序为咖啡因、安替比林。

2.2对照品溶液的制备

取安替比林对照品与咖啡因对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1 ml中含安替比林27 µg与咖啡因2.7 µg的溶液。

2.3供试品溶液的制备

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于安替比林0.27 g），置100ml量瓶中，加水适量振摇使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1 ml，置100 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4阴性对照溶液的制备

按处方比例配制不含安替比林和咖啡因的阴性样品［2-3］，按供试品溶液的制备方法配制阴性对照溶液，注入液相色谱仪，结果在阴性对照溶液色谱图中未检出与对照品溶液两个主成分峰保留时间一致的色谱峰。

2.5标准曲线

取安替比林与咖啡因对照品适量，精密称定，加水溶解分别制成每1 ml中含安替比林0.014 12 mg与咖啡因0.002 793 mg 的混合溶液，分别精密吸取1、10、20、35、50 µl，注入液相色谱仪，记录峰面积，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程，安替比林：Y=5 061.2X+3.641，R=1.000 0；咖啡因：Y=3 585.5X+0.192 4，R=1.000 0。结果表明安替比林进样量在0.014 12～0.706 20 µg、咖啡因进样量在0.002 79～0.139 60 µg，均与峰面积呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验

精密量取对照品溶液20 µl，注入液相色谱仪，重复进样6次，记录色谱峰面积，安替比林与咖啡因的RSD均为0.1%。

2.7稳定性试验

取同一供试品溶液，分别于0、6、12、18、24 h时，注入液相色谱仪，记录色谱峰面积，安替比林与咖啡因的RSD分别为0.2%，0.6%。

2.8重复性试验

取同一批次供试品（批号：140104），按2.3项下方法制备6份供试品溶液，测定含量，安替比林、咖啡因的平均含量与RSD分别为97.1%、0.4%，93.8%、0.9%。

2.9样品的测定

按上述方法测定3批样品中安替比林与咖啡因的含量，结果见表1。

表1　3批样品含量测定结果

3　讨论

经紫外-可见分光光度计扫描，安替比林分别在242 nm与255 nm波长处有最大吸收，咖啡因在273 nm波长处有最大吸收，因咖啡因处方量小，故选择273 nm为该方法的测定波长［4-5］。

参考氨基比林咖啡因片［1］的色谱条件，以甲醇—水（35： 65）为流动相，结果安替比林色谱峰的拖尾因子较大，经试验将流动相优化为乙腈—水（20：80）后，安替比林色谱峰对称性较好。考察不同品牌色谱柱测定本品，两个主成分均分离效果良好，且测定结果重现性较好，本品对不同品牌色谱柱均适用［6-8］。

参考文献

［1］国家药典委员会.国家药品监督管理局国家药品标准（化学药品地方标准上升国家标准）第十一册［S］.2002：1.

［2］闫海燕.高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量［J］.化学与生物工程，2010，27（10）：92-94.

［3］王军，权勤波，宋健健，等.UFLC同时测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚与和咖啡因的含量［J］.中国药师，2009，12（12）：1775-1777.

［4］刘玲，苏仁俊.高效液相色谱法测定复方氨林巴比妥注射液中氨基比林和安替比林的含量［J］.中国医院药学杂志，2008，28（11）：84-85.

［5］朱莹，赵霓，王璐.HPLC法测定复方柳安咖注射液中水杨酸钠、安替比林和咖啡因的含量［J］.西北药学杂志，2012，27（1）：34-36.

［6］李安平，杨锡，丁永辉，等.一测多评HPLC法测定丹参注射液中7个水溶性成分含量［J］.药物分析杂志，2012，32（9）：1534-1540.

［7］郝爱鱼，赵丽元，刘英慧，等.HPLC法测定中药饮片中黄曲霉毒素残留量的假阳性研究［J］.药物分析杂志，2013，33（3）：458-464.

［8］张春玲.HPLC法测定金赤苓胶囊中盐酸小檗碱含量［J］.中国社区医师（医学专业），2011，13（26）：8-9.

Determination of Antipyrine and Caffeine Contents of Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets by HPLC

LIU Zhenling WANG Jia’nan Jilin Province Institute for Drug Control，Chemical Room，Changchun 130033，China

【Abstract】

Objective We measured antipyrine and caffeine content in the Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets by HPLC.Methods We used Waters C18 column， and used acetonitrile-water（20:80）as the mobile phase，and the detection wavelength was 273 nm.Results The injection volume of antipyrine was 0.014 12 to 0.706 20 μg， and the injection volume of caffeine was 0.002 79 to 0.139 60 μg.They were associated with the peak area showed a good linear relationship.The antipyrine’s and caffeine’s average recovery and RSD respectively 99.7%，0.6%，100.0%，0.5%（n=9）.Conclusion The method is simple，accurate，specific，reproducible，and can be used for quality control of the preparation.

【Key words】Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets，HPLC，Antipyrine，Caffeine

doi：10.3969/j.issn.1674-9316.2016.04.083

【中图分类号】R927

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9316（2016）04-0118-02