王　媚　吴春萍　曹晓娟　郑文伟　范国康

(1浙江大学医学院附属第二医院耳鼻咽喉科　杭州　310009;2上海中医药大学附属市中医医院耳鼻咽喉科　上海　200071;

3复旦大学附属眼耳鼻喉科医院头颈外科　上海　200031;4嘉兴学院附属第二医院耳鼻咽喉科　嘉兴　314000)



喉肿瘤相关成纤维细胞促进原代喉鳞状细胞癌细胞体外生长

王媚1,2▲吴春萍3▲曹晓娟4郑文伟4范国康1△

(1浙江大学医学院附属第二医院耳鼻咽喉科杭州310009;2上海中医药大学附属市中医医院耳鼻咽喉科上海200071;

3复旦大学附属眼耳鼻喉科医院头颈外科上海200031;4嘉兴学院附属第二医院耳鼻咽喉科嘉兴314000)

【摘要】目的验证喉肿瘤相关成纤维细胞 (cancer associated fibroblasts,CAFs)对原代培养的喉鳞状细胞癌 (laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞的体外生长是否有促进作用。方法选取20例喉癌临床标本进行原代培养,将生长出的原代喉癌细胞中的CAFs通过差速消化法去除后继续单独培养,相差显微镜观察喉癌细胞在传代培养过程中的形态学变化,流式细胞仪检测喉癌细胞在传代过程中凋亡细胞比例的变化,Western blot检测喉癌细胞在传代过程中凋亡蛋白Caspase 3表达水平的变化,以始终与CAFs共培养传代的喉癌细胞作为对照。结果与CAFs分离后喉癌原代细胞在体外传代培养过程中生长活性很快下降,多数在3代以内停止生长。相差显微镜观察到形态学上凋亡漂浮的喉癌细胞逐代增多,流式细胞仪检测到的凋亡细胞比例逐代增加,Western blot检测到的Caspase 3表达水平逐代增加;而始终与CAFs共培养生长的LSCC细胞在传代过……