陈艳琳,王颖芳

(广东药科大学 中药学院，广东 广州 510006)



microRNA定量检测方法研究现状

陈艳琳,王颖芳

(广东药科大学 中药学院，广东 广州 510006)

MicroRNA(miRNA)是一类由18～24 nt核酸构成的非编码内源性小分子RNA，主要参与真核生物的细胞分化、增殖与凋亡等转录后水平的基因表达调控。研究发现，miRNA与肿瘤、代谢调控、疾病发生及诊断等方面有密切的联系，因此准确且灵敏地进行miRNA的定量检测是深入研究miRNA功能的前提。目前，miRNA定量检测原理主要基于核酸杂交或扩增，包括Northern印迹、微阵列芯片、实时定量PCR、滚环扩增等。本文通过对传统miRNA检测方法、高灵敏度新型miRNA检测方法进行阐述与分析，为筛选合适的miRNA定量检测方法提供参考。

microRNA； 实时定量PCR； 滚环扩增； Northern印迹

在现代生物学、医学研究中，microRNA(miRNA)是真核生物体内必不可少的调节因子。多数成熟miRNA具有高保守性，其可通过与靶mRNA 3′末端非翻译区( untranslational region,UTR)完全或不完全碱基配对，使靶mRNA降解或抑制翻译，进而参与转录后水平的靶基因表达调控[1-2]。研究表明，在肿瘤的发生及发展过程中，miRNA可作为一种分子标志物对靶基因介导的信号转导通路进行调控[3-4]，这为miRNA作为新的生物标志因子用于癌症等重大疾病的早期诊断提供依据，也揭示了miRNA在评估疾病表达水平中的重要性。

成熟miRNA的表达具有时空特异性、组织特异性[5-6]，在生物体内能抑制靶mRNA转录、翻译等，所以在多种真核生物过程中发挥着重要作用，尤其在细胞发育、植物生长等调控表达尤为突出。随着对miRNA、siRNA等小分子RNA的大量深入……