二烯丙基二硫对非小细胞肺癌细胞miR-200b表达的影响及意义
2016-04-05罗卫民罗湘玉郭家龙林称意刘越峰
罗卫民,罗湘玉,郭家龙,林称意,刘越峰
(湖北医药学院附属十堰市太和医院,湖北十堰442000)
二烯丙基二硫对非小细胞肺癌细胞miR-200b表达的影响及意义
罗卫民,罗湘玉,郭家龙,林称意,刘越峰
(湖北医药学院附属十堰市太和医院,湖北十堰442000)
目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)对人非小细胞肺癌A549(A549细胞)miR-200b表达的影响及意义。方法 常规培养A549细胞、人支气管上皮16HBE细胞,连续培养48 h时采用RT-PCR法检测miR-200b相对表达量;将A549细胞分别与终浓度为0、25、50、100、200、400 μmol/L的DADS共培养,连续培养48 h时采用RT-PCR法检测miR-200b相对表达量。将常规培养的A549细胞随机分为五组,scramble组转染miR-200b无关序列,miR-200b组转染miR-200b模拟物,空白组仅加培养液常规培养,DADS组加入200 μmol/L DADS处理,DADS+miR-200b组转染miR-200b 模拟物的同时加入200 μmol/L DADS处理,各组均连续培养48 h时,采用MTT法检测细胞增殖情况(OD值)。结果 16HBE细胞miR-200b相对表达量为1.364±0.031,高于A549细胞的0.673±0.023(P<0.05);0、25、50、100、200、400 μmol/L DADS处理A549细胞48 h时miR-200b相对表达量分别为0.673±0.023、0.752±0.019、0.805±0.011、1.041±0.049、1.176±0.046、1.342±0.051,各浓度间比较P均<0.05。scramble组、miR-200b组、空白组、DADS组、DADS+miR-200b组OD值分别为0.740±0.027、0.552±0.024、0.735±0.021、0.561±0.027、0.462±0.026,miR-200b组、DADS组、DADS+miR-200b组OD值均低于scramble组及空白组,DADS+miR-200b 组均低于DADS组及miR-200b组,组间比较P均<0.05。结论 DADS能够上调A549细胞miR-200b表达,进而抑制细胞增殖,发挥抗肿瘤作用。
非小细胞肺癌;二烯丙基二硫;miR-200b
二烯丙基二硫(DADS)是从大蒜中提取的天然有机硫化物,可抑制多种肿瘤的发生、发展,包括鼻咽癌、结肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌等[1~5],其作用机制主要为抑制DNA加合物形成,阻滞细胞周期演进,诱导肿瘤细胞分化与凋亡,抑制肿瘤血管形成与侵袭等[6]。研究显示,miR-200b在多种肿瘤中表达下调,发挥抑癌基因样作用[7,8]。但是,miR-200b与肺癌发生、发展的关系,以及DADA对其表达的影响尚不完全明确。2015年3~8月,本研究观察了DADS对人非小细胞肺癌A549细胞miR-200b表达的影响,现分析结果并探讨其意义。
1 材料与方法
1.1 材料 人非小细胞肺癌A549细胞株和人支气管上皮16HBE细胞由中山大学肿瘤研究所惠赠;……
