一种由污染引起的葡萄叶斑病的调查

摘要：对山东省济宁市农业科学研究院寄来的一份葡萄异常叶片样品进行了症状描述、保湿镜检、病原菌分离鉴定及回接，结果表明：该葡萄异常叶片并非由病原菌侵染引起。于是对该葡萄园的地理周边环境进行了调查，发现位于该园上风口有一家砖厂，明确该现象是由砖厂生产过程中所产生的污染引起。

关键词：葡萄；叶斑病；调查

葡萄是我国果业生产的重要品种。农业部统计资料显示，截至2010年底，我国葡萄栽培总面积达55.2万hm2，居世界第4位[1]，病害严重影响葡萄的产量与品质。本研究室在收到病样后，通过症状描述、病原菌分离鉴定及果园地理位置调查，以期准确对病样进行诊断，从而为葡萄生产提供科学指导。

1　材料与方法

1.1材料。2015年8月21日，本研究室收到山东省济宁市农业科学研究院寄来的一份葡萄病叶样品。

1.2方法

1.2.1症状描述及保湿镜检。该样品叶片褪绿、叶脉明显，上有褐色枯斑，病斑不规则、较小，严重时连片、出现穿孔。病斑上无明显侵染点，无霉层。病斑上滴无菌水保湿12 h后镜检。

1.2.2病原菌分离及鉴定。将病叶病斑交界处剪成2 mm见方的小块，用75%酒精消毒30 s，0.1%升汞消毒30 s，无菌水漂洗3遍后置于PDA培养基上，26℃、黑暗条件培养3 d，挑取菌落边缘新鲜菌丝，转入PDA平板上继续培养，纯化后保存备用[2]。刮取纯化菌株的菌丝用液氮研成粉末，用艾德莱真菌基因组提取试剂盒提取基因组DNA，用真菌通用引物ITS1&ITS4进行PCR扩增后，交由北京诺赛基因组研究中心测序，测序结果在NCBI网站上进行BLAST比对。……