孙爱华，陈劲，关恒明，李平

(1安徽医科大学附属省立医院，合肥230001；2安徽医科大学附属合肥医院·合肥市第二人民医院)



·论著·

丹皮酚对肝癌HepG2/ADM细胞株多药耐药性的逆转作用及其机制

孙爱华1,2，陈劲2，关恒明2，李平1

(1安徽医科大学附属省立医院，合肥230001；2安徽医科大学附属合肥医院·合肥市第二人民医院)

摘要：目的探讨丹皮酚体外给药对肝癌耐药细胞株HepG2/阿霉素(ADM)多药耐药性的逆转作用及其可能分子机制。方法 采用人的肝癌细胞株HepG2,体外ADM浓度递增法诱导建立耐药肝癌细胞HepG2/ADM 耐药模型。分别用0、5、10、25、50、100 μmol/L的丹皮酚培养液培养HepG2/ADM、HepG2细胞48 h,选定25、50 μmol/L丹皮酚进行下一步实验。分别采用ADM(0.01、0.2、0.5、0.75、1.5、3.0 μmol/L)和氟尿嘧啶(0、1、2、4、10、20、40 μmol/L)单独刺激，及25、50 μmol/L丹皮酚联合上述各浓度的氟尿嘧啶及ADM联合刺激2种细胞株。采用MTT法检测HepG2/ADM、HepG2细胞的增殖水平，流式细胞仪检测HepG2/ADM、HepG2细胞内细胞毒药物含量，蛋白免疫印迹法检测肿瘤细胞P-糖蛋白表达水平。结果ADM抑制HepG2/ADM、HepG2细胞株的IC50依次为1.48、124.14 μmol/L，耐药指数为83.9；丹皮酚(25、50 μmol/L)能够明显增强ADM、氟尿嘧啶对HepG2/ADM细胞株的细胞毒作用，并降低IC50值(P均<0.01)，但对HepG2细胞的细胞毒作用无明显影响；丹皮酚(25、50 μmol/L)能够明显增加HepG2/ADM细胞株对ADM的摄取能力(P均<0.01)，但对HepG2细胞株无明显影响；丹皮酚能显著降低HepG2/ADM细胞株P-糖蛋白表达水平(P均<0.01)，但对HepG2细胞株P-糖蛋白水平无明显影响。结论 丹皮酚对HepG2/ADM细胞株多药耐药性具有明显的逆转作用，可能与其抑制HepG2/ADM 细胞株P-糖蛋白表达、增加细胞毒药物细胞内摄取有关。

关键词：肝肿瘤；HepG2/阿霉素细胞株；丹皮酚；多药耐药；P-糖蛋白

肝癌是临床最常见的恶性肿瘤，其发病机制未完全阐明[1]。目前临床用于治疗肝癌的化疗药物疗效差，不良反应明显[2]。研究[3]发现，P-糖蛋白介导的肿瘤细胞多药耐药是导致常规化疗药物药效较低的主要原因。丹皮酚是中药牡丹根皮、徐长卿全草的主要活性成分，具有抗心律失常、预防动脉粥样硬化、抑制血小板聚集、抗肿瘤和抗炎等多种药理活性[4，5]。……