刘　娣，王鑫鑫，别　墅，张冬杰，汪　亮，李　苓，曹　越（.东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨　50030；.黑龙江省农业科学院畜牧研究所，哈尔滨　50086）



民猪NUMB基因克隆与组织表达分析

刘娣1,2，王鑫鑫1，别墅1，张冬杰2，汪亮2，李苓1，曹越1
（1.东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨150030；2.黑龙江省农业科学院畜牧研究所，哈尔滨150086）

摘要：研究采用RT-PCR技术结合克隆测序方法，克隆出全长2 004 bp NUMB基因序列，其中包括1 782 bp开放读码框，该基因编码592个氨基酸。利用生物信息学分析软件对该基因氨基酸序列预测与分析发现：NUMB蛋白二级结构中，转角占很大比例，且蛋白亲水性较强，结构功能域分析发现该蛋白多肽链存在一个N端磷酸酪氨酸结构域（PTB），位于第37~162氨基酸之间。基于不同物种NUMB蛋白序列所构建分子进化树表明，猪与牛、骆驼亲缘关系最近，而与斑马鱼最远。在mRNA水平上，NUMB基因肺中表达量最高，大肠中表达量最低。

关键词：民猪；NUMB基因；反转录PCR；克隆；生物信息学

刘娣,王鑫鑫,别墅,等.民猪NUMB基因克隆与组织表达分析[J].东北农业大学学报, 2016, 47(1): 51-57.

Liu Di, Wang Xinxin, Bie Shu, et al. Cloning and tissue expression analysis of Min pig NUMB gene[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2016, 47(1): 51-57. (in Chinese with English abstract)

细胞命运决定因子NUMB是一种膜相关蛋白，在进化上相对保守。最先在果蝇神经系统中被发现[1]，随后在多个哺乳动物体内发现该基因存在，并称为mNUMB基因[2]。该基因一般具有两个保守结构，一个是磷酸酪氨酸结构（PTB），一个是羧基端结构（PRR），这两个结构可分别与LDAP⁃NY、α衔接蛋白和E3泛素激酶等多种蛋白相互作用，行使不同生物学功能[3]。其在细胞不对称分裂、内吞、生长、粘附、迁移等过程中发挥作用，并通过Notch和P53等信号途径决定细胞命运[4-6]。……