郑彩霞，黄晓琳，陆敏，张凤霞，郭雅碧，韩肖华

血管性痴呆(vascular dementia, VaD)是指由缺血性卒中、出血性卒中和造成脑区低灌注的脑血管疾病所致的严重认知功能障碍综合征。在全世界范围内，VaD是仅次于阿尔茨海默氏病(Alzheimer's disease, AD)的第二大痴呆类型，约占痴呆总数的20%～30%[1]。近年来，越来越多的临床研究及实验研究证实针灸对VaD引起的学习记忆功能下降具有明显的保护和改善作用，但其具体作用机制尚不明确[2-3]。韩肖华等[4]发现电针(electroacupuncture, EA)刺激百会穴和大椎穴可以提高脑缺血大鼠Morris水迷宫成绩，机制可能与EA刺激可能激活海马区PKA/CREB信号通路，上调其下游的Bcl-2靶基因转录水平，使翻译成的Bcl-2蛋白量增多，进而发挥抗神经元凋亡作用相关；Li等[5]在后来的研究中也表明EA可能是通过cAMP/PKA/CREB通路改善多发性脑梗塞大鼠的学习记忆功能。研究表明，miR-212/132可能受转录因子CREB(cAMP-response element binding)[6]和转录抑制因子REST/NRSF(Repressor Element 1 silencing transcription factor/neuron-restrictive silencer factor)调控[7]，其中CREB存在于神经细胞中，而REST存在于小鼠胚胎成纤维细胞中。miR132和miR212串联基因的正常表达是神经元发育、成熟、发挥正常功能的必要条件，它们的异常表达会引起一些神经系统疾病，如AD和tau疾病[8]。由于海马区miR-212/132成熟产物主要是miR132，miR132被认为在成年小鼠海马区新生神经元的突触生长和分支中发挥重要作用[9]。miR132可能通过抑制GTP酶活化蛋白p250GAP而促进树突棘成熟，影响突触形成[10]。本实验旨在初步探讨EA是否通过激活PKA/CREB信号通路影响miR132及其下游p250GAP蛋白表达，为EA改善学习记忆障碍的内在机制提出新的证据。

1 材料与方法

1.1 材料 ①实验动物：健康成……