汤礼宾　章志福

(深圳市龙华新区人民医院　广东 深圳　518109)



Survivin、Smac/DIABLO表达水平与胎膜早破的关系分析

汤礼宾章志福

(深圳市龙华新区人民医院广东 深圳518109)

【摘要】目的研究Survivin、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂(Smac)/DIABLO与胎膜早破的关系。方法选取深圳市龙华新区人民医院收治的30例胎膜早破孕妇作为观察组，同期选取30例体检正常的孕妇作为对照组。两组均采集孕妇胎膜破口部位组织，采用免疫组织生化方法测定胎膜组织中Survivin及Smac/ DIABLO表达水平。结果观察组患者胎膜组织细胞Survivin及Smac/ DIABLO蛋白阳性检出率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论Survivin及Smac/DIABLO表达水平与孕妇胎膜早破关系密切，可以较准确地反应胎膜早破的情况，可为临床诊断提高依据。

【关键词】Survivin蛋白；半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂；胎膜早破

胎膜早破是临床上较为常见的一种妇产科并发症，主要是由于胎膜细胞凋亡从而降低患者的胎膜组织强度和弹性所致[1]。临床研究表明，患者的胎膜细胞凋亡情况与Survivin及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂(Smac)/ DIABLO蛋白表达水平相关[2]。本研究就Survivin、Smac/ DIABLO与胎膜早破的关系进行分析，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取深圳市龙华新区人民医院2013年8月至2014年6月收治的30例胎膜早破孕妇作为观察组，孕周为32～42周，年龄为20～35岁，单活胎。另外选取30例同期体检正常的孕妇作为对照组，年龄为22～37岁，孕周为33～42周，单活胎。两组研究对象年龄、孕周等基本资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2检测方法采集胎膜破口处组织(2 cm×2 cm×0.5 cm)，采用免疫组织生化检测方法测定胎膜组织中的Survivin以及Smac/ DIABLO蛋白水平。检测主要试剂：TUNEL试剂盒购自美国Roche公司，兔抗人Smac多克隆抗体由北京博奥森公司提供，ABC步法试剂盒、DAB试剂盒由武汉博士德公司提供。采用TUNEL试剂盒进行胎膜凋亡细胞原位标记，检测患者血液样本中细胞因子的凋亡水平。将标记好的溶液作为TUNEL反应混合物。将光镜下观察到的细胞核棕黄色颗粒细胞作为阳性细胞，即凋亡细胞。将每例采样血液样本均计数500个细胞。凋亡指数为TUNEL染色阳性检测细胞的百分率。采用10%浓度的福尔马林溶液对所有采样的血液标本进行固定，用石蜡包埋，切片后制成4 mm左右的石蜡切片，然后做HE染色。采用免疫组化ABC法检测Survivin和Smac/DIABLO在胎膜中的表达情况。以细胞核和(或)细胞质出现棕黄颗粒为Survivin阳性。

1.3结果评价选取5个高倍视野(×400)进行检测，其中每个视野计数中含有100个肿瘤细胞，应用临床半定量积分法判断检测结果：阳性细胞数含量0%～5%为0分，含量6%～25%为1分，含量26%～50%为2分，含量51%～75%为3分，含量>75%为4分；阳性检测强度以患者多数细胞的呈色反应为准，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。2者之积为最后评分。Smac在胎膜中的表达主要在羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养层细胞薄膜和胞浆，阳性细胞染色呈棕黄色，不着色为阴性。

1.4统计学方法采用统计学软件SPSS 17.0进行数据处理。定性资料采取率表示，组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1Survivin蛋白阳性检出率对照组患者胎膜组织细胞检出Survivin蛋白阳性7例(23.33%)，观察组检出16例(53.33%)。观察组患者胎膜组织细胞Survivin蛋白阳性检出率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2Smac/DIABLO蛋白阳性检出率对照组患者胎膜组织细胞检出Smac/DIABLO蛋白阳性13例(43.33%)，观察组检出23例(76.67%)。观察组患者胎膜组织细胞Smac/DIABLO蛋白阳性检出率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

3讨论

胎膜早破是妇产科临床较常见的一种妊娠期并发症[3]。该病病情复杂凶险，其确切致病机制尚未明确。临床主要表现为突发性阴道排液、脐带脱垂及宫内感染等严重症状，极有可能导致早产，增加新生儿死亡的风险。同时，胎膜早破也会威胁到产妇的生命健康与安全。有研究数据表明，胎膜早破并发症的发生与患者胎膜细胞凋亡有关[4]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族中的一种，具有抑制细胞凋亡及调节细胞周期的双重功能。Survivin主要表达于胚胎和发育的胎儿内部组织中。目前研究数据表明，Survivin在多种肿瘤中的高表达与肿瘤的发生、发展以及转移均密切相关[5]。但是，Survivin与胎膜早破的关系研究相对较少。Smac/DIABLO是一种新近发现的线粒体膜间蛋白，是Caspase的线粒体激活因子。Smac/DIABLO通过解除凋亡抑制蛋白对Caspase 3、7和9的抑制作用而发挥促凋亡作用。目前已有实验证实抑制Smac/DIABLO的表达可减少细胞凋亡，但仅从蛋白角度进行研究，未直接检测胎膜早破患者及正常孕妇胎膜组织中细胞凋亡的情况。目前Survivin与Smac/DIABLO这对抑制细胞凋亡和促进细胞凋亡的蛋白在胎膜早破患者胎膜组织中的表达与细胞凋亡是否具有一致性有待检验。

本研究结果显示，两组患者检测结果都发现了Survivin与Smac/DIABLO的表达，观察组患者Survivin蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)，说明Survivin蛋白表达水平与孕妇胎膜早破关系密切，可以较准确地反应患者胎膜的状况。观察组胎膜组织Smac/DIABLO表达水平显著高于对照组(P<0.05)，说明胎膜组织Smac/DIABLO表达水平与孕妇胎膜早破有关，具有较高的诊断价值。

综上所述，Survivin、Smac/DIABLO与孕妇胎膜早破的关系密切，可以较准确地反应胎膜早破的情况，可为临床诊断提高依据。

参考文献

[1]李颖,胡琼,王凯,等.细胞色素C、Smac与胎膜早破相关性的研究[J].遵义医学院学报,2011,34(6):591-594.

[2]王春妍,杨向东,胡东胜.大承气汤对急性肝衰竭大鼠肝组织Smac、细胞色素C及Caspase-3表达的影响[J].中华中医药杂志,2015,30(4):1249-1252.

[3]赵媛媛,王妙英,焦朋增,等.孕产妇血清中Toll-4、MMP-9、sICAM-1水平与早产和未足月胎膜早破的相关性研究[J].现代中西医结合杂志,2015,24(26):2930-2932.

[4]张阁.胎膜早破孕妇血清CRP和白介素-1与胎膜早破相关性分析[J].临床医学工程,2015,22(6):757-758.

[5]王妙英,焦朋增,赵媛媛.蛋白酶、IL-8与未足月胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎及妊娠结局的关系[J].现代中西医结合杂志,2015,24(20):2188-2190,2206.

(收稿日期：2015-12-08)

【中图分类号】R 714.43+3

doi:10.3969/j.issn.1004-437X.2016.04.023