沙守峰，李俊才，王家珍，蔡忠民，李宏军，姜晓艳

（辽宁省果树科学研究所，辽宁 熊岳 115009）

果实中通常都含有一定量的有机酸，与糖一起形成一定的糖酸比，决定果实风味[1]。梨的育种调查发现，有机酸含量极高的果实，无论糖含量多少，品质均不佳。果实中有柠檬酸、苹果酸、奎尼酸、草酸、莽草酸和乳酸等多种有机酸[2]，梨的品种不同，有机酸种类和含量也不同，果实的风味也就千差万别。近年来，国内外对果实有机酸的研究不断深入，在有机酸的组分、含量及相关酶方面做了大量研究工作[3～6]。但以往对于果实有机酸调控方面的研究报道很少。果实酸度偏高一直是柑橘、枇杷、油桃和部分梨果生产中存在的重要问题之一，研究果实有机酸调控对于果品产业的发展不仅具有重要的理论意义，也具有重要的实践意义。

梨树在生长生育过程中从外界吸收氮、磷、钾、钙、镁和稀土等矿质营养，通过树体不同部位特定代谢过程，影响树体生长、产量及品质[7]。梨树生产是为消费者提供高质量果品，对养分要求相对严格。本试验以‘早金酥’为试材，分析叶面喷施氮、磷、钾、钙、镁和稀土肥对果实有机酸含量的影响，探讨各种肥料与果实有机酸含量的关系，以便从一个侧面揭示矿质营养与果实品质的关系，为科学施肥提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验与样品处理

试验于2015年果树生长季节进行。供试材料为6年生‘早金酥’梨，砧木为山梨，种植于辽宁省果树科学研究所梨试验园。试验园土壤为沙壤土，pH值6.28，土壤有机质含量0.54%（w·w-1）、全氮含量0.06% 、磷含量0.05%、全钾含量1.82%。用于取样的‘早金酥’共35株，树势基本一致，行株距4m×2m。于果树生长季节叶面喷施1%尿素、0.2%磷酸二氢钾、1%硫酸钾、0.1%氯化钙、1%硫酸镁、0.05%稀土；对照树喷清水。每7d喷施1次，共喷施5次。每种肥和清水喷施5株树。果实成熟（盛花期后100d左右）时每株树随机从树冠外围中上部和结果枝中上部采果实5个，取样时间为上午10时。将所采果实去皮和去心，5个果的果肉切成小块混合在一起，取10g左右放入冻存管，用液氮处理后保存于-70℃待用。

1.2 测定方法

有机酸测定参考Nisperos-Carriedo等[8]的方法，准确称取梨果肉1.00 g，用5 mL 0.2%偏磷酸冰浴研磨，10000r离心15min，残渣加入4mL 0.2%偏磷酸再提取，合并上清液，定容至10mL，经0.45μm滤膜过滤后待测。每个样品重复3次。使用仪器为戴安U-3000高效液相色谱仪，配有UV/VIS检测器，色谱柱为XB-C18（4.6mm×250mm）；流动相为0.2%偏磷酸水溶液；流速1mL·min-1，柱温 35℃，进样量 10.0μL，检测波长 210nm。所用试剂为分析纯偏磷酸，色谱纯级标准样品：柠檬酸、苹果酸、奎尼酸、草酸、莽草酸、乳酸，由 Sigma-Aldrich公司提供。

试验数据统计分析借助DPS程序，Duncan新复极差法多重比较。图表使用Excel制成。

2 结果与分析

2.1 氮肥对果实有机酸含量的影响

由图1-A可以看出，‘早金酥’梨叶面喷施尿素，果实奎尼酸、柠檬酸和总有机酸含量显著增加，而乳酸的含量显著降低。具体表现为，奎尼酸含量0.710 mg·g-1，比对照 0.433 mg·g-1增加 63.97%；柠檬酸含量0.193 mg·g-1，比对照 0.096 mg·g-1增加 101.04%；总有机酸含量 2.449 mg·g-1， 比对照 1.958 mg·g-1增加25.08%；而乳酸含量 0.016 mg·g-1，比对照 0.051 mg·g-1降低68.63%。

2.2 磷酸二氢钾对果实有机酸含量的影响

由图1-B可以看出，‘早金酥’梨叶面喷施磷酸二氢钾肥，果实中苹果酸、草酸和总有机酸含量显著降低。具体表现为，苹果酸含量1.070 mg·g-1，比对照1.595mg·g-1降低32.92%；草酸含量0.127mg·g-1，比对照0.181mg·g-1降低29.83%；总有机酸含量1.753mg·g-1，比对照2.431mg·g-1降低 27.89%。

2.3 硫酸钾对果实有机酸含量的影响

由图1-C所示，‘早金酥’梨叶面喷施硫酸钾，果实苹果酸、奎尼酸和总有机酸的含量显著增加，而莽草酸和乳酸的含量显著降低。具体表现为，苹果酸含量1.505mg·g-1，比对照 1.070mg·g-1增加 40.65%；奎尼酸含量 0.560mg·g-1，比对照 0.429mg·g-1增加 30.54%；总有机酸含量 2.263 mg·g-1， 比对照 1.783 mg·g-1增加26.92%；而莽草酸含量0.025mg·g-1，比对照0.061mg·g-1降低59.02%；乳酸含量0.001mg·g-1，比对照0.021 mg·g-1降低95.24%。

2.4 氯化钙对果实有机酸含量的影响

由图1-D可以看出，‘早金酥’梨叶面喷施氯化钙，果实苹果酸、柠檬酸和总有机酸含量显著降低。具体表现为，苹果酸含量 0.668mg·g-1，比对照 1.169mg·g-1降低42.86%；柠檬酸含量 0.039 mg·g-1，比对照0.076 mg·g-1降低 48.68%；总有机酸含量 1.280 mg·g-1，比对照1.777mg·g-1降低 27.97%。

2.5 硫酸镁对果实有机酸含量的影响

由图1-E可以看出，‘早金酥’梨叶面喷施硫酸镁，果实奎尼酸、柠檬酸和总有机酸含量显著增加。具体表现为，奎尼酸含量0.684 mg·g-1，比对照 0.372 mg·g-1增加83.87%；柠檬酸含量 0.224 mg·g-1，比对照0.096mg·g-1增加133.33%； 总有机酸含量2.477mg·g-1，比对照1.817mg·g-1增加36.32%。

2.6 稀土对果实有机酸含量的影响

由图1-F可以看出，‘早金酥’梨叶面喷施稀土，果实奎尼酸、莽草酸、乳酸和总有机酸的含量显著降低。具体表现为，奎尼酸含量0.383 mg·g-1，比对照0.837mg·g-1降低54.24%；莽草酸含量0.031mg·g-1，比对照0.078mg·g-1降低60.26%；乳酸含量0.001mg·g-1，比对照0.021mg·g-1降低95.24%；总有机酸含量1.397 mg·g-1，对照 2.126mg·g-1，降低 34.29%。

3 结论

‘早金酥’梨在树体生长季节进行叶面喷施氮、磷、钾、钙、镁和稀土肥，可以影响果实中不同有机酸的含量，进而影响果实中总有机酸的含量。喷施氮肥可以显著增加果实奎尼酸、柠檬酸和总有机酸含量，显著降低乳酸含量；喷施磷酸二氢钾可以显著降低果实苹果酸、草酸和总有机酸含量；喷施硫酸钾可以显著增加果实苹果酸、奎尼酸和总有机酸含量，显著降低果实莽草酸和乳酸含量；喷施氯化钙可以显著降低果实苹果酸、柠檬酸和总有机酸含量；喷施硫酸镁可以显著增加果实奎尼酸、柠檬酸和总有机酸含量；喷施稀土肥可以显著降低奎尼酸、柠檬酸、莽草酸、乳酸和总有机酸含量。其中喷施磷、钙和稀土肥可使‘早金酥’果实总有机酸含量显著降低。

[1]ARFAIOLI P，BOSETTO M.Time changes of free organic acid contents in seven Italian pear （Pyrus communis）varieties with different ripening times [J]. Agricoltura Mediterranea，Ospedaletto，1993，123：224-230.

[2]HUDINA M，STAMPAR F.Sugars and organic acids contents of European （Pyrus communis L.）and Asian （Pytus serotina Rehd.）pear cultivars[J].Acta Alimentaria，2000，29（3）：217-230.

[3]KAFKAS E，KOS.AR M，TüREMIS N，et al.Analysis of sugars，organic acids and vitamin C contents of blackberry genotypes from Turkry[J].Food Chemistry，2006，97：732-736.

[4]STURM K，KORON D，STAMPAR F.The composition of fruit of different strawberry varieties depending on maturity stage[J].Food Chemistry，2003，83：417-422.

[5]MARSH K，ATTANAYAKE S，WALKER S，et al.Acidity and taste in kivifruit[J].Postharvest Biology and Technology，2004，32：159-168.

[6]TIITINEN K M，YANG B，HARALDSSON G G.Fast analysis ofsugars，fruitacids，and vitamin C in sea buckthorn（Hippophaё rhamnoides L.）varieties[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，2006，54：2508-2513.

[7]SATYENDRA K，IMTIYAZM，AAHWANIK.Effectof differential soil moisture and nutrient regimes on postharvest attributes of onion （Allium cepa L.）[J].Scientia Horticulturae，2007，26：121-129.

[8]NISPEROS-CARRIEDO M O，BUSLIG B S，SHAW P E.Simultaneous detection of dehydroascorbic，ascorbic and some organic acids in fruits and vegetables by HPLC[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry，1992，40：1 127-1 130.