大肠杆菌O抗原定型血清标定用抗原的制备
2016-02-07张媛王秀丽刘博张磊李建彭国瑞辛凌翔蒋玉文
张媛,王秀丽,刘博,张磊,李建,彭国瑞,辛凌翔,蒋玉文
(中国兽医药品监察所,北京 100081)
大肠杆菌O抗原定型血清标定用抗原的制备
张媛,王秀丽,刘博,张磊,李建,彭国瑞,辛凌翔,蒋玉文*
(中国兽医药品监察所,北京 100081)
为研制用于标定大肠杆菌菌体抗原(O抗原)单因子定型血清效价的抗原,以大肠杆菌参考菌株CVCC1345(O2)、CVCC1350(O7)、CVCC1414(O74)为菌种,经条件优化确定了抗原制备的工艺。检测结果表明,当菌液调整至OD600 nm值为0.147±0.026时,各型抗原的浓度为1×109CFU/mL,将其热处理后制备成反应抗原。按此吸光值各自制备3批抗原,3批抗原与血清的凝集价均分别一致,分别达到211(O2)、212(O7)及29(O74)。用180种大肠杆菌O抗原单因子定型血清对制备的抗原进行检测,制备的抗原仅与其对应型的血清发生特异性反应,与其余179种血清均不发生反应。研究结果显示,制备的抗原具有较好的稳定性及特异性,可以用于大肠杆菌菌体单因子定型血清效价的标定。
大肠杆菌;菌体抗原;单因子血清
大肠杆菌菌体抗原(O抗原)是大肠杆菌的脂多糖分子的一部分,是菌株血清分型的主要依据。大肠杆菌的O抗原型非常多,至今已发现180种之多。研究资料表明,常引起猪大肠杆菌病的血清型有O1、O2、O3、O6、O8、O9、O11、O14、O15、O17、O18、O20、O22、O23、O24、O26、O32、O35、O38、O44、O45、O48、O51、O52、O53、O54、O55、O60、O64、O65、O78、O89,O91、O93、O97、O98、O101、O102、O104、O107、O115、O118、O119,O125、O126、O132、O137、O138、O139、O141、O147、O149、O152、O153、O156、O157、O159、O163等[1~5]。鸡大肠杆菌病通常是由O1、O2、O78三种血清型的大肠杆菌所引起,此外也有研究学者从发病鸡病料中分离到血清型为O3、O4、O8、O9、O11、O15、O18、O20、O22、O26、O30、O35、O36、O38、O50、O60、O75、O76、O81、O88、O89、O93、O103、O111、O114、O115、O127、O128、O131、O133、O143、O149、O152、O159、O161的大肠杆菌[6~8]。鸭致病性大肠杆菌的血清型以O76、O78、O92、O142最为常见[9]。奶牛致病性大肠杆菌血清型中以O6、O10、O17、O21、O51、O53、O60、O77、O92、O101、O125、O148、O158较为普遍[10~11]。犬、猫、鸽子等宠物致病性大肠杆菌的优势血清型是O10、O24、O64、O119、O137、O147、O149、O157等[12]。……
