甘蓝型油菜BnTIR1基因的克隆和表达特征分析
2016-02-06谢伶俐袁程飞许本波长江大学生命科学学院湖北荆州434025
陈 帆,谢伶俐,袁程飞,许本波(长江大学 生命科学学院,湖北 荆州 434025)
甘蓝型油菜BnTIR1基因的克隆和表达特征分析
陈 帆,谢伶俐,袁程飞,许本波*
(长江大学 生命科学学院,湖北 荆州 434025)
植物的转运抑制应答因子1(transport inhibitor response 1,TIR1)作为生长素的受体,在生长素信号的感知与转导过程中发挥重要作用。采用RACE技术从中双9号中克隆了甘蓝型油菜BnTIR1全长cDNA序列和基因组序列。BnTIR1 的DNA序列为2 502 bp,包含2个内含子;cDNA序列为2 355 bp,ORF为1 824 bp,其编码蛋白含607个氨基酸。预测发现,BnTIR1蛋白存在AMN1保守结构域。qRT-PCR结果表明,BnTIR1 在甘蓝型油菜根、茎、叶、芽、花、角果中均有表达,但表达水平不同,在叶中表达水平最高,花中最低;干旱和ABA均可诱导BnTIR1表达,暗示其可能参与植物逆境胁迫响应过程。
甘蓝型油菜; 克隆; 转运抑制应答因子1; ABA
植物激素影响植物细胞的分化、形态建成等多个方面[1-2]。植物对生长素信号的感知与转导是通过转运抑制应答因子(transport inhibitor response 1/auxin signaling F-box,TIR1/AFB F-box)[3]、生长素/吲哚乙酸转录抑制因子(Aux/IAA transcriptional repressors)[4]和ARF转录因子(ARF transcription factors)[5]等激素受体实现的。TIR1/AFB F-box充当激素受体,感知激素信号,促进Aux/IAA的泛素化降解[6]。人们最早从拟南芥中发现TIR1[7],研究结果表明,TIR1作为生长素的受体参与生长素信号的转导[6]。AtTIR1蛋白含有1个F-box结构域和多个富亮氨酸重复基序LRR,TIR1通过F-box结构域形成泛素化降解途径中的E3连接酶复合体SCFTIR1(skp1-cullin-F-box protein),促进Aux/IAA的泛素化降解,释放ARF(auxin responsive factor)蛋白,进而调控相关基因的表达[8-9]。为研究TIR1在甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)生长发育与抗逆过程中的作用,从甘蓝型油菜中双9号中克隆了BnTIR1基因,并分析了其在不同组织部位及逆境下的表达特征,以期为利用TIR1调控植物的抗逆性奠定基础。……
