张冬云 辽宁省盘锦市双台子区疾病预防控制中心 (辽宁 盘锦 124000)

酶标仪在血液检验上的应用分析

张冬云 辽宁省盘锦市双台子区疾病预防控制中心 (辽宁 盘锦 124000)

目的：观察酶标仪在梅毒、艾滋病中的临床应用效果。方法：结合临床化学检验操作规程，设定相应的工作程序，建立采血、测定到打印结果超微量化学检验流程，分析酶标仪在血液检验中的临床应用效果。结果：以梅毒、艾滋病为例，分别取三份血清，采用本法进行批内、批间20次重复实验。其中，批内CV为4.5%、4.9%、4.2%；批间CV为6.9%、5.6%及5.1%。当样本梅毒、艾滋病活性升高到160卡门单位时，检测结果已经不是线性关系，此时可以采用等渗盐水将标本稀释后再进行检测。在三种已经确定梅毒、艾滋病的血清中加入分别加入一种梅毒、艾滋病，混合后根据梅毒、艾滋病方法进行测定，结果显示：标本回收率为93.4%、97.6%及102.0%，平均回收率为97.6%。稳定性结果显示：10～90min内相对比较稳定，显色10min后比色相对比较理想。结论：血液检验上艾滋病和梅毒预防中采用酶标仪测定效果理想，能准确、稳定、微量、快速、简便的提高效率，降低检验成本，减少消耗，值得推广应用。

酶标仪 血液检验 应用效果 检验成本

艾滋病、梅毒是临床上常见的性病，其传播主要以性传播为主，患者发病后如果不采取积极有效的方法治疗将会诱发其他疾病，严重者将威胁患者生命。目前，临床上对于艾滋病、梅毒尚缺乏理想的诊断方法，但是长期疗效欠佳，临床误诊率或漏诊率较高，难以达到预期的诊断效果。随着医疗技术的不断发展，自动生化分析仪在化学检验中得到应用，且效果理想，该方法能实现临床化学检验的微量快速分析[1]。但是，该诊断方法对设备要求较高，难以在基础医院推广普遍。近年来，酶标仪在血液检验中得到应用，该方法能实现快速、准确、稳定、微量目的，并且能大大提高工作效率，报道如下。

1.资料与方法

1.1 仪器

①SLT400SF酶标仪；②edp-2自动加样器；③234系列UBA微量加样器；④RA-XT全自动生化分析仪；⑤酶标板及0.2ml聚苯乙烯离心管；⑥DG-3022A型酶标仪。

1.2 方法

1.2.1 实验准备

将SLT400SF酶标仪根据要求编制相应的程序，采用程序分吸光度值和测定值进行打印。同时，DG-3022A型酶标仪根据实验测定内容校准波长，做好比色测定[2]。向所选的酶标仪中加入空白试剂在酶标仪上进行比色，打印各个孔的吸光度值。校准edp-2自动加样器和234系列UBA微量加样器，保证加样器准确度误差≤±1%，变异系数＜1%。

1.2.2 采血方法

使用的血量甚微，一般只需要在手指、耳垂等末梢部位进行常规方法刺血即可。采用微量吸管吸住血，将其注入0.2ml小离心管中，待血液凝固后进行5min离心，速度为3000rpm。在96孔酶标板A1、A2作为空白对照组，A3-A4作为标准孔，各标准孔均为双控，其余各孔均为测量孔，设置测定总量为300ul，操作相关操作步骤必须严格遵循仪器及试剂盒相关操作进行。

1.3 统计分析

采用SPSS18.0软件处理，计数资料行x2检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（±s）表示，P＜0.05差异有统计学意义。

2.结果

2.1 精密度测定

为了保证酶标仪在血液检验中测定更具针对性，实验中以梅毒、艾滋病为例，分别取三份血清，采用本法进行批内、批间20次重复实验。其中，批内CV为4.5%、4.9%、4.2%；批间CV为6.9%、5.6%及5.1%。

2.2 线性范围

采用等渗盐水将高活性的梅毒、艾滋病血清作为试验标本测定其线性范围，结果显示：当样本梅毒、艾滋病活性升高到160卡门单位时，检测结果已经不是线性关系，此时可以采用等渗盐水将标本稀释后再进行检测[3～5]。

2.3 回收率

在三种已经确定梅毒、艾滋病单位的血清中加入分别加入梅毒、艾滋病，混合后根据梅毒、艾滋病方法进行测定，结果显示：标本回收率为93.4%、97.6%及102.0%，平均回收率为97.6%。

2.4 稳定性试验

采用1份血清测定梅毒、艾滋病生成量，加入浓度为0.4mmol/LNaOHh显色后在不同的时间点进行比色（5、10、15、30、60、90及120min），结果显示：10～90min内相对比较稳定，显色10min后比色相对比较理想。

3.讨论

酶联免疫吸附试验时七十年代初在酶联免疫组织化学基础上发展起来的，并且在国内血站临床试验中主要的检测技术，由于多数酶联免疫吸附试验最后均需要采用比色测定，使得酶标仪成为酶联免疫吸附中重要的工具[6]。本研究中，根据酶标仪精密的比色系统和仪器软件，配备一些简单的附件，根据检验项目程序并参考全国临床检验操作方法按照一定比例缩小，从而形成了采血、检测到打印结果的工作流程。本研究中，为了保证酶标仪在血液检验中测定更具针对性，实验中以梅毒、艾滋病为例，分别取三份血清，采用本法进行批内、批间20次重复实验。其中，批内CV为4.5%、4.9%、4.2%；批间CV为6.9%、5.6%及5.1%。

酶标仪是临床上梅毒和艾滋病中常用的筛查方法，该方法具备软件功能和精密的光学系统。通过软件功能能控制整机测量及检验程序的处理，并且能显示或打印结果；而通过酶标仪光学系统原理也是根据朗博-比尔定律演变而来，具有较高的精度，并且检测速度较快，能实现批量检测。本研究中，采用等渗盐水将高活性的梅毒、艾滋病血清作为试验标本测定其线性范围，结果显示：当样本梅毒、艾滋病活性升高到160卡门单位时，检测结果已经不是线性关系，此时可以采用等渗盐水将标本稀释后再进行检测[7]。同时，酶标仪检测时不但可以实现酶标仪一机多用，既可以实现免疫学试验，也可以作为多种临床化学检验，具有测试稳定、采血微量、节约试剂等优点。本研究中，在三种已经确定梅毒、艾滋病单位的血清中加入分别加入梅毒、艾滋病，混合后根据梅毒、艾滋病方法进行测定，结果显示：标本回收率为93.4%、97.6%及102.0%，平均回收率为97.6%。但是，临床上采用不同酶标仪作为标板或同一酶标板的不同孔对实验的重复性均具有明显的影响。出现这种现象的原因是多方面的，由于不同酶标板底透光度不均一，同一板孔内的液体存在重复性误差，因此，临床上采用酶标仪测定时应该进行酶标板的本底数值，从测定孔吸光度值中去除本底数值，提高检测精度，在疾病筛查中发挥了重要的作用，能实现艾滋病和梅毒的筛查，正确的指导患者治疗。本研究中，采用1份血清测定梅毒、艾滋病生成量，加入浓度为0.4mmol/NaOH显色后在不同的时间点进行比色（5、10、15、30、60、90及120min），结果显示：10～90min内相对比较稳定，显色10min后比色相对比较理想。

综上所述，血液检验上艾滋病和梅毒预防中采用酶标仪测定效果理想，能准确、稳定、微量、快速、简便的提高效率，降低检验成本，减少消耗，值得推广应用。

[1] 苑瑞琴, 兴安, 张力, 等. 290例血液标本不合格原因分析及对策[J]. 临床输血与检验, 2012,13(2):363-366.

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[3] 付增祺, 赵荫林, 马光湖, 等. 关于临床血液检验质量控制的探讨[J]. 西北国防医学杂志, 2011,16(1):150-155.

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[6] 张林渊. 免疫学检验分析前采血标本质量控制的问题与应对措施分析[J]. 大家健康:学术版, 2014,8(7):57-58.

[7] 杨姣. 免疫学检验分析前采血标本质量控制的问题与应对策略[J]. 基层医学论坛, 2014,18(2)：222-223.

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