孟富慧，　陈　利，　徐　适，　鲜　明，　张　辉，　李建华，　董　颀，　杨春涛△

(1广州医科大学生理教研室，广东 广州 511436； 2华盛顿州立大学化学教研室，美国 华盛顿州 普尔曼市 99164)



四硫代钼酸铵作为新型硫化氢供体的鉴定及其对皮肤细胞的保护作用*

孟富慧1，陈利1，徐适2，鲜明2，张辉1，李建华1，董颀1，杨春涛1△

(1广州医科大学生理教研室，广东 广州 511436；2华盛顿州立大学化学教研室，美国 华盛顿州 普尔曼市 99164)

[摘要]目的： 本研究旨在检测金属络合物四硫代钼酸铵(ATTM)的硫化氢(H2S)释放能力并进一步观察其减轻氧化应激诱导的皮肤细胞损伤的作用。方法：反应瓶法检测ATTM在细胞培养基中释放的H2S，二氯二氢荧光素二乙酸酯或罗丹明123染色结合荧光显微镜照相术分别检测细胞内活性氧簇(ROS)的含量和线粒体膜电位(ΔΨm)，用试剂盒检测细胞存活率和乳酸脱氢酶(LDH)的释放。结果：与H2S供体GYY4137类似，ATTM在细胞培养基中可剂量依赖性地释放H2S。在25～400 μmol/L 的浓度范围内，ATTM处理对人皮肤细胞(HaCaT细胞)的存活率无明显影响(P>0.05)。紫外线照射或外源性给予ROS供体(过氧化氢，H2O2)处理均可增加HaCaT细胞内ROS的含量。400 μmol/L H2O2处理可明显降低HaCaT细胞的存活率(P<0.01)，而在H2O2处理前给予ATTM预处理，细胞存活率明显提高，其中在100和200 μmol/L浓度时ATTM具有最好的细胞保护作用(P<0.01)。400 μmol/L H2O2处理还可损害细胞的ΔΨm和细胞膜并使LDH释放增加(P<0.01)。而在细胞遭受损伤前给予200 μmol/L ATTM预处理可明显改善ΔΨm的水平(P<0.05)并抑制LDH从细胞内释放(P<0.01)。结论：ATTM具有释放H2S的能力并可保护人皮肤细胞对抗氧化应激诱导的损伤效应。

[关键词]HaCaT细胞； 硫化氢； 四硫代钼酸铵； 氧化应激

硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)是继一氧化氮(nitric oxide，NO) 和一氧化碳(carbon monoxide，CO)之后被发现的第3种气体信号分子，在体内起着广泛的生理及病理作用，具有重要的研究价值和临床应用前景。其效应主要涵盖了舒张血管降低血压、抑制氧/硝化应激损伤、调节炎症反应、对抗缺血-再灌注引起的器官损伤、调节胰岛素的分泌和受体敏感性等[1]。亚……