王　财，张玉霞，陈志余，瞿述根，王晓莉，陈　凡※

(1.青海大学附属医院；2.青海大学医学院)



MMP-9、TIMP-1在放疗后乳腺癌患者中的表达及其临床意义*

王财1，张玉霞2，陈志余2，瞿述根2，王晓莉1，陈凡1※

(1.青海大学附属医院；2.青海大学医学院)

摘要目的探讨MMP-9、TIMP-1在乳腺癌患者放疗后的表达及其临床意义。方法收集40例乳腺癌患者放疗前后的血清，以ELISA法检测MMP-9、TIMP-1表达，并分析其与年龄、TNM分期、肿瘤长度、淋巴结转移情况的相关性。结果MMP-9、TIMP-1表达在乳腺癌患者的年龄、TNM分期、肿瘤长度及淋巴结转移之间有统计学差异(P<0.05)；与放疗前比较，MMP-9表达上升，TIMP-1下降(P<0.05)，MMP-9/TIMP-1比值增加(P<0.05)。Kaplan-Meier分析发现，中位生存期为36.00(95%CI=35.13~36.88)个月。放疗前、后MMP-9/TIMP-1比值高度相关，R=0.907。结论乳腺癌患者放疗后MMP-9、TIMP-1表达改变，与患者预后密切相关，可作为乳腺癌放疗后预后的重要指标。

关键词乳腺癌放疗基质金属蛋白酶-9基质金属蛋白酶抑制剂-1

CLINICAL SIGNIFICANCE OF MMP-9 AND TIMP-1

EXPRESSION IN BREAST CANCER AFTER RADIOTHERAPY*

Wang Cai1，Zhang Yuxia2，Chen Zhiyu2，Qu Shugen2，Wang Xiaoli1，Chen Fan1※

(1.Qinghai University Medical College；2.Qinghai University Affiliated Hospital)

Abstract ObjectiveTo investigate the clinical significance of MMP-9 and TIMP-1 expression after radiotherapy in breast cancer.Methods Serum of 40 breast cancer patients were collected before and after radiotherapy.The expression of MMP-9 and TIMP-1 were measured by ELISA，and analyzed the relationship between age，TNM stage，tumor length，and lymphatic metastasis.Results There was statistics difference in age，TNM stage，tumor length and lymphatic metastasis in patients with breast cancer by means of the expression of MMP-9 and TIMP-1(P<0.05).The expression of MMP-9 was increasing compared with pre-radiotherapy，as to MMP-9/TIMP-1 ratio，the TIMP-1 was decreased(P<0.05).The median survival time was 36.00(95% CI=35.13~36.88) months by Kaplan-Meier.There was high correlation of MMP-9/TIMP-1 ratio before and after radiotherapy with equal to 0.907 of R.Conclusion There is changed expression of MMP-9 and TIMP-1 and has closely correlated with the prognosis of patients，and can be used as an important index of prognosis in breast cancer after radiotherapy.

KeywordsBreast cancerRadiation therapyMMP-9TIMP-1

尽管有许多关于MMP-9、TIMP-1在肿瘤组织中的表达研究，但在放疗后的乳腺癌研究未见报道[1，2]。本研究拟就其相关关系报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料

收集40例在青海大学附属医院行根治术或保乳术后首程在放疗科住院接受放射治疗的女性乳腺癌患者进行回顾性研究，年龄34~71(中位年龄为55.1±12.7)岁，均经组织病理学确诊。其中I期6例，Ⅱ期21例，Ⅲ期13例，肿瘤长度<2 cm者10例，2~5 cm者19例，>5 cm者11例，无局部淋巴结转移者15例，有转移者25例。KPS≥80分，排除其他慢性病(肺心病、糖尿病、高血压等)。

1.2放疗方案

所有患者均仰卧位于X线模拟下用负压垫固定体位，CT模拟机下定位后，行6 MeV电子线胸壁切线野照射，照射范围：上界与腋锁野下界接野，内界与内乳野相接，外界为腋中线，下界为对侧乳房皱褶下2 cm；模拟机下观察切肺边界不超过2.5 cm，常规加300的楔形板，总剂量为50 Gy，常规分割2 Gy/次，5 次/周。

1.3因子检测方法

于放疗前、后清晨空腹抽取静脉血2 mL于依地酸(EDTA)抗凝管中，离心(5000r/min)10 min，收集血清于冻存管中，-80 ℃超低温保存备用。用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测患者血清MMP-9、TIMP-1含量。严格按照美国R&D公司提供试剂盒说明书操作，用北京朗普酶标仪检测MMP-9、TIMP-1吸光度值，并绘制标准曲线，计算表达含量。

1.4统计方法

2结果

2.1MMP-9、TIMP-1在乳腺癌患者中的表达(表1)

Table 1±s，ng/mL)

注：*与第一组比较P<0.05，#与放疗前比较P<0.05.

表1显示，MMP-9、TIMP-1表达在乳腺癌患者的年龄、TNM分期、肿瘤长度及淋巴结转移之间有统计学差异(P<0.05)；与放疗前比较，MMP-9表达上升，TIMP-1表达下降，有统计学差异(P<0.05)。

2.2MMP-9/TIMP-1与乳腺癌放疗后关系的确定(表2)

Table 2±s)

表2显示，与放疗前比较，放疗对MMP-9/TIMP-1比值的影响较大(P<0.05)，会增加比值。

2.3放疗前、后MMP-9/TIMP-1比值相关性及生存分析(图1~2)

图1　放疗前后MMP-9/TIMP-1比值散点图

图2　放疗后乳腺癌无进展生存期情况

对乳腺癌患者Pearson相关分析发现(图1)，放疗前、后MMP-9/TIMP-1比值有高度相关性，R=0.907。对乳腺癌患者进行Kaplan-Meier分析发现(图2)，中位生存期为36.00个月，95%CI为35.13~36.88。

3讨论

本研究对乳腺癌恶性肿瘤患者术后行放疗后显示，放疗会改变MMP-9、TIMP-1表达，与患者预后密切相关，可作为乳腺癌放疗后预后的重要指标。

全世界每年有超过一百万新发乳腺癌患者[3]，因无明确诊断指标判断预后，造成后续治疗方案设计依据不足。在健康成年人体中，MMP-9水平较低，只有在机体受到外界刺激时，其水平才会发生改变。有研究显示血清MMP-9表达水平差异不仅表现在病人中，在健康人群中也有相关表达[4]，但这种表达含量的差异性在目前许多研究中还没有统一的定论[5，6]。

据报道，乳腺癌患者中乳腺组织及癌旁组织中MMP-9、TIMP-1表达明显增加，并且随着肿瘤组织的扩大、淋巴结转移，MMP-9、TIMP-1表达增加显著[7-9]。本研究通过ELISA法检测MMP-9、TIMP-1在乳腺癌患者血清中的表达显示，MMP-9、TIMP-1表达在乳腺癌患者的年龄、TNM分期、肿瘤长度及淋巴结转移之间有统计学差异(P<0.05)，年龄越大、分期越晚、肿瘤越长、有淋巴结转移者MMP-9表达越多，而TIMP-1表达减少，与吴正升等[10]研究结果一致。金诚[11]研究发现，乳腺癌患者在局部6 MVx线50 Gy后局部加量16 Gy电子线照射，18个月内97.5%的患者没有局部复发和远处转移，本研究通过Kaplan-Meier分析发现，5年乳腺癌患者无进展中位生存期为36.0(95%CI为35.13~36.88)个月，与其他学者研究乳腺癌患者术后中位生存期60.00个月不一致[12]。可能由于本研究采用无进展生存期计算，所以会降低生存期数。加之青海高原特殊地理环境等因素影响，也可能会影响后程治疗，共同导致此生存期结果差异。

本研究通过放疗前、后MMP-9/TIMP-1比值相关分析发现，放疗后与放疗前比较，MMP-9/TIMP-1比值存在高度相关性，R=0.907，MMP-9表达上升，TIMP-1下降(P<0.05)，导致MMP-9/TIMP-1比值总体上升。放射治疗通过破坏组织细胞结构，MMP-9表达上升，作用于ECM，导致ECM降解，引起照射区域损伤增加，可使局部皮肤反应上升，但因电子射线对肿瘤细胞的杀伤作用较大，从而使肿瘤复发率明显下降，这种MMP-9高表达与控制率上升存在的矛盾有待进一步从流行病和分子生物学角度进行更加深入的研究。

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收稿日期2015-05-02第36卷第4期

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2015.04.010

中图分类号R735．2

文献标识码A

* 青海省卫生计划生育委员会项目

王财(1974~)，男，汉族，青海籍，主管技师.※：通讯作者，主任医师，教授，Email-chfa1964@ 126.com